中国病理生理杂志
中國病理生理雜誌
중국병리생리잡지
CHINESE JOURNAL OF PATHOPHYSIOLOGY
2013年
2期
225-230
,共6页
朱尚玲%彭蔚湘%罗敏琪%王明霞%林灼锋%黄建林
硃尚玲%彭蔚湘%囉敏琪%王明霞%林灼鋒%黃建林
주상령%팽위상%라민기%왕명하%림작봉%황건림
关节炎,类风湿%Smoothened%RNA干扰%内皮细胞%细胞凋亡
關節炎,類風濕%Smoothened%RNA榦擾%內皮細胞%細胞凋亡
관절염,류풍습%Smoothened%RNA간우%내피세포%세포조망
目的:初步观察Sonic Hedgehog信号通路分子Smoothened(Smo)在类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)滑膜血管内皮细胞的表达及其生物学意义.方法:收集4例病情中度活动的RA患者的滑膜组织,同时收集4例外伤或半月板损伤(无关节炎)者滑膜组织作为对照组,免疫组化检测滑膜组织Smo蛋白表达情况.采用人脐静脉内皮细胞系EA.hy926作为滑膜血管内皮细胞的模型,予不同浓度肿瘤坏死因子α(TNF-α)处理,Western blotting检测Smo蛋白表达;采用RNAi技术转染体外合成的特异性Smo-siRNA,应用Western blotting检测沉默效果;转染siRNA 24 h后,经TNF-α/放线菌素D(actinomycin D,ActD)诱导细胞凋亡,CCK-8法检测细胞存活率,流式细胞术检测细胞凋亡情况.结果:RA患者滑膜组织Smo表达高于对照组,以血管内皮细胞表达尤为明显.EA.hy926细胞经TNF-α刺激后,Smo蛋白表达上调(P<0.05).RNA干扰EA.hy926细胞Smo表达后,细胞存活率为(24.30±0.45)%,低于阴性对照组的(36.86±0.62)%(P<0.05),细胞凋亡率为(48.00±1.96)%,高于阴性对照组的(31.70±0.82)%(P<0.05).结论:Smo可能参与了RA患者滑膜组织血管内皮细胞凋亡的调控.
目的:初步觀察Sonic Hedgehog信號通路分子Smoothened(Smo)在類風濕關節炎(rheumatoid arthritis,RA)滑膜血管內皮細胞的錶達及其生物學意義.方法:收集4例病情中度活動的RA患者的滑膜組織,同時收集4例外傷或半月闆損傷(無關節炎)者滑膜組織作為對照組,免疫組化檢測滑膜組織Smo蛋白錶達情況.採用人臍靜脈內皮細胞繫EA.hy926作為滑膜血管內皮細胞的模型,予不同濃度腫瘤壞死因子α(TNF-α)處理,Western blotting檢測Smo蛋白錶達;採用RNAi技術轉染體外閤成的特異性Smo-siRNA,應用Western blotting檢測沉默效果;轉染siRNA 24 h後,經TNF-α/放線菌素D(actinomycin D,ActD)誘導細胞凋亡,CCK-8法檢測細胞存活率,流式細胞術檢測細胞凋亡情況.結果:RA患者滑膜組織Smo錶達高于對照組,以血管內皮細胞錶達尤為明顯.EA.hy926細胞經TNF-α刺激後,Smo蛋白錶達上調(P<0.05).RNA榦擾EA.hy926細胞Smo錶達後,細胞存活率為(24.30±0.45)%,低于陰性對照組的(36.86±0.62)%(P<0.05),細胞凋亡率為(48.00±1.96)%,高于陰性對照組的(31.70±0.82)%(P<0.05).結論:Smo可能參與瞭RA患者滑膜組織血管內皮細胞凋亡的調控.
목적:초보관찰Sonic Hedgehog신호통로분자Smoothened(Smo)재류풍습관절염(rheumatoid arthritis,RA)활막혈관내피세포적표체급기생물학의의.방법:수집4례병정중도활동적RA환자적활막조직,동시수집4예외상혹반월판손상(무관절염)자활막조직작위대조조,면역조화검측활막조직Smo단백표체정황.채용인제정맥내피세포계EA.hy926작위활막혈관내피세포적모형,여불동농도종류배사인자α(TNF-α)처리,Western blotting검측Smo단백표체;채용RNAi기술전염체외합성적특이성Smo-siRNA,응용Western blotting검측침묵효과;전염siRNA 24 h후,경TNF-α/방선균소D(actinomycin D,ActD)유도세포조망,CCK-8법검측세포존활솔,류식세포술검측세포조망정황.결과:RA환자활막조직Smo표체고우대조조,이혈관내피세포표체우위명현.EA.hy926세포경TNF-α자격후,Smo단백표체상조(P<0.05).RNA간우EA.hy926세포Smo표체후,세포존활솔위(24.30±0.45)%,저우음성대조조적(36.86±0.62)%(P<0.05),세포조망솔위(48.00±1.96)%,고우음성대조조적(31.70±0.82)%(P<0.05).결론:Smo가능삼여료RA환자활막조직혈관내피세포조망적조공.
