CAJ | 학술논문

目的:探讨乙型肝炎病毒X蛋白(HBx)抑制分泌型卷曲相关蛋白5(SFRP5)启动子活性的分子机制.方法:扩增不同长度的SFRP5启动子区片段,构建到萤光素酶报告基因载体pGL3-Basic上,并将构建好的重组质粒转染入正常肝细胞系LO2细胞,再分别感染编码HBx的腺病毒(Ad-HBx)或编码绿色荧光蛋白的腺病毒(Ad-GFP),荧光显微镜下观察病毒感染效率,检测萤光素酶活性以观察HBx对SFRP5启动子活性的影响.结果:(1) 含不同长度的SFRP5启动子区截短突变报告质粒构建成功.(2) 截短突变报告质粒的萤光素酶活性与pGL3-Basic对照组相比,分别为(6.32±0.04)倍(-478 bp~+47 bp)、(5.79±0.32)倍(-811 bp~+47 bp)、(3.59±0.34)倍(-1 235 bp~+47 bp)、(3.86±0.39)倍(-1 677 bp~+47 bp)、(3.26±0.42)倍(-2 072 bp~+47 bp) (均P<0.05).过表达HBx可以明显抑制SFRP5启动子活性,抑制率分别为44%(-478 bp~+47 bp) (P<0.05)、46%(-811 bp~+47 bp) (P<0.05)、28%(-1 235 bp~+47 bp)、24%(-1 677 bp~+47 bp)和40%(-2 072 bp~+47 bp).结论:HBx可以明显抑制SFRP5启动子区活性,可能导致SFRP5基因表达下调.
목적:탐토을형간염병독X단백(HBx)억제분비형권곡상관단백5(SFRP5)계동자활성적분자궤제.방법:확증불동장도적SFRP5계동자구편단,구건도형광소매보고기인재체pGL3-Basic상,병장구건호적중조질립전염입정상간세포계LO2세포,재분별감염편마HBx적선병독(Ad-HBx)혹편마록색형광단백적선병독(Ad-GFP),형광현미경하관찰병독감염효솔,검측형광소매활성이관찰HBx대SFRP5계동자활성적영향.결과:(1) 함불동장도적SFRP5계동자구절단돌변보고질립구건성공.(2) 절단돌변보고질립적형광소매활성여pGL3-Basic대조조상비,분별위(6.32±0.04)배(-478 bp~+47 bp)、(5.79±0.32)배(-811 bp~+47 bp)、(3.59±0.34)배(-1 235 bp~+47 bp)、(3.86±0.39)배(-1 677 bp~+47 bp)、(3.26±0.42)배(-2 072 bp~+47 bp) (균P<0.05).과표체HBx가이명현억제SFRP5계동자활성,억제솔분별위44%(-478 bp~+47 bp) (P<0.05)、46%(-811 bp~+47 bp) (P<0.05)、28%(-1 235 bp~+47 bp)、24%(-1 677 bp~+47 bp)화40%(-2 072 bp~+47 bp).결론:HBx가이명현억제SFRP5계동자구활성,가능도치SFRP5기인표체하조.