CAJ | 학술논문

灵芝细胞在液体静置和振荡培养方式下，抗癌物质灵芝酸的产量有显著的差别。采用抑制消减杂交法分离了灵芝细胞在两种不同培养方式下差异表达的基因，对构建的差减文库进行筛选后获得了一个灵芝的EST序列。根据这个EST序列，采用RACE—PCR的方法成功克隆到了灵芝G蛋白β亚基（Gb）基因（GenBank登录号GQ293361）。序列分析显示这个基因cDNA全长1217bp，编码了313个氨基酸。同源性分析表明其编码的氨基酸与其他蘑菇类真菌G13的氨基酸序列同源性较高，与Copri．nopsiscinerea（XP_001830441．1）、Lentinulaedodes（AAP13580．2）和Schizophyllumcommune（XP-003029882．1）的一致性分别达到91％、91％和90％。实时荧光定量PCR结果表明这个基因在液体静置培养方式下的表达量显著高于振荡培养。
령지세포재액체정치화진탕배양방식하，항암물질령지산적산량유현저적차별。채용억제소감잡교법분리료령지세포재량충불동배양방식하차이표체적기인，대구건적차감문고진행사선후획득료일개령지적EST서렬。근거저개EST서렬，채용RACE—PCR적방법성공극륭도료령지G단백β아기（Gb）기인（GenBank등록호GQ293361）。서렬분석현시저개기인cDNA전장1217bp，편마료313개안기산。동원성분석표명기편마적안기산여기타마고류진균G13적안기산서렬동원성교고，여Copri．nopsiscinerea（XP_001830441．1）、Lentinulaedodes（AAP13580．2）화Schizophyllumcommune（XP-003029882．1）적일치성분별체도91％、91％화90％。실시형광정량PCR결과표명저개기인재액체정치배양방식하적표체량현저고우진탕배양。