浙江医学
浙江醫學
절강의학
ZHEJIANG MEDICAL JOURNAL
2012年
7期
500-505
,共6页
潘映秋%章霞%周美英%颜卫华
潘映鞦%章霞%週美英%顏衛華
반영추%장하%주미영%안위화
p33ING2蛋白%肺癌%基因转染%凋亡
p33ING2蛋白%肺癌%基因轉染%凋亡
p33ING2단백%폐암%기인전염%조망
目的 构建抑癌基因生长抑制因子2(ING2)真核表达载体,研究p33ING2对人肺腺癌细胞A549及人小细胞肺癌细胞NCI-H446体外生长的影响.方法 构建ING2基因的真核表达载体pcDNA3.1(+)-ING2,采用脂质体法分别转染A549和NCI-H446细胞,以未转染组和转染pcDNA3.1(+)空质粒组作为对照,应用RT-PCR、细胞免疫组化和Western blot法分析目的基因及其蛋白表达,CCK8试剂盒分析其对细胞生长的影响,Annexin V-FITC和PI双染流式细胞术观察细胞凋亡的情况.结果 成功构建了重组真核表达载体pcDNA3.1(+)- ING2,转染后细胞株高水平表达ING2 mRNA及p33ING2蛋白.CCK8法检测结果显示:转染pcDNA3.1(+)-ING2的A549细胞和NCI-H446细胞增殖受到抑制,抑制率与pcDNA3.1(+)空质粒转染组比较,差异有统计学意义(P<0.01).流式细胞术凋亡检测结果显示:转染pcDNA3.1(+)-ING2的A549细胞和NCI-H446细胞组凋亡率均高于未转染组和pcDNA3.1(+)空质粒转染组,差异均有统计学意义(P<0.01).结论 ING2蛋白表达能抑制人肺腺癌细胞A549和人小细胞肺癌细胞NCI-H446增殖及增加细胞凋亡率.
目的 構建抑癌基因生長抑製因子2(ING2)真覈錶達載體,研究p33ING2對人肺腺癌細胞A549及人小細胞肺癌細胞NCI-H446體外生長的影響.方法 構建ING2基因的真覈錶達載體pcDNA3.1(+)-ING2,採用脂質體法分彆轉染A549和NCI-H446細胞,以未轉染組和轉染pcDNA3.1(+)空質粒組作為對照,應用RT-PCR、細胞免疫組化和Western blot法分析目的基因及其蛋白錶達,CCK8試劑盒分析其對細胞生長的影響,Annexin V-FITC和PI雙染流式細胞術觀察細胞凋亡的情況.結果 成功構建瞭重組真覈錶達載體pcDNA3.1(+)- ING2,轉染後細胞株高水平錶達ING2 mRNA及p33ING2蛋白.CCK8法檢測結果顯示:轉染pcDNA3.1(+)-ING2的A549細胞和NCI-H446細胞增殖受到抑製,抑製率與pcDNA3.1(+)空質粒轉染組比較,差異有統計學意義(P<0.01).流式細胞術凋亡檢測結果顯示:轉染pcDNA3.1(+)-ING2的A549細胞和NCI-H446細胞組凋亡率均高于未轉染組和pcDNA3.1(+)空質粒轉染組,差異均有統計學意義(P<0.01).結論 ING2蛋白錶達能抑製人肺腺癌細胞A549和人小細胞肺癌細胞NCI-H446增殖及增加細胞凋亡率.
목적 구건억암기인생장억제인자2(ING2)진핵표체재체,연구p33ING2대인폐선암세포A549급인소세포폐암세포NCI-H446체외생장적영향.방법 구건ING2기인적진핵표체재체pcDNA3.1(+)-ING2,채용지질체법분별전염A549화NCI-H446세포,이미전염조화전염pcDNA3.1(+)공질립조작위대조,응용RT-PCR、세포면역조화화Western blot법분석목적기인급기단백표체,CCK8시제합분석기대세포생장적영향,Annexin V-FITC화PI쌍염류식세포술관찰세포조망적정황.결과 성공구건료중조진핵표체재체pcDNA3.1(+)- ING2,전염후세포주고수평표체ING2 mRNA급p33ING2단백.CCK8법검측결과현시:전염pcDNA3.1(+)-ING2적A549세포화NCI-H446세포증식수도억제,억제솔여pcDNA3.1(+)공질립전염조비교,차이유통계학의의(P<0.01).류식세포술조망검측결과현시:전염pcDNA3.1(+)-ING2적A549세포화NCI-H446세포조조망솔균고우미전염조화pcDNA3.1(+)공질립전염조,차이균유통계학의의(P<0.01).결론 ING2단백표체능억제인폐선암세포A549화인소세포폐암세포NCI-H446증식급증가세포조망솔.
