广东医学
廣東醫學
엄동의학
GUNAGDONG MEDICAL JOURNAL
2013年
23期
3558-3561
,共4页
曾元凤%肖移生%路名芝%吴晓牧%辛洪波
曾元鳳%肖移生%路名芝%吳曉牧%辛洪波
증원봉%초이생%로명지%오효목%신홍파
FMNL3基因%下调%结直肠癌%增殖%侵袭
FMNL3基因%下調%結直腸癌%增殖%侵襲
FMNL3기인%하조%결직장암%증식%침습
目的 探讨下调FMNL3基因表达对SW620细胞体外增殖和侵袭能力的影响.方法 用脂质体转染法将FMNL3干扰质粒pcDNA3.1-EGFP-FMNL3-shRNA1(shRNA1组)和pcDNA3.1-EGFP-FMNL3-shRNA2(shRNA2组)转染结直肠癌SW620细胞,以无关序列(pcDNA3.1-EGFP-FMNL3-scramble)转染为阴性对照(scramble组),以未转染质粒的SW620为正常对照(NC组).荧光显微镜下评估转染效率,实时荧光定量PCR法检测FMNL3基因的干扰效率,MTT实验检测FMNL3基因沉默前后SW620细胞生长和增殖情况,Transwell小室法检测干扰前后细胞的体外侵袭能力变化.结果 各组转染效率分别为scramble组 (74.35±5.93)%,shRNA1组(72.33±7.65)%,shRNA2组(73.17±4.32)%,差异无统计学意义(P>0.05);与NC组相比,转染48 h各组细胞中FMNL3 mRNA表达水平分别为scramble 组(93.35±6.33)%,shRNA1组(16.44±4.37)%,shRNA2组(18.51±5.16)%,两个shRNA组细胞FMNL3 mRNA表达水平显著下调,其中shRNA1组下调最多,干扰效率最高;与NC组和scramble组细胞相比,shRNA1和shRNA2组细胞48 h和72 h体外增殖活力明显下降(均P<0.05),其48 h穿出Transwell小室人工基底膜的细胞数明显减少(P<0.01).结论 下调FMNL3基因表达后,结直肠癌SW620细胞的体外增殖和体外侵袭能力均明显下降,FMNL3可能正向调控结直肠癌细胞的增殖和侵袭.
目的 探討下調FMNL3基因錶達對SW620細胞體外增殖和侵襲能力的影響.方法 用脂質體轉染法將FMNL3榦擾質粒pcDNA3.1-EGFP-FMNL3-shRNA1(shRNA1組)和pcDNA3.1-EGFP-FMNL3-shRNA2(shRNA2組)轉染結直腸癌SW620細胞,以無關序列(pcDNA3.1-EGFP-FMNL3-scramble)轉染為陰性對照(scramble組),以未轉染質粒的SW620為正常對照(NC組).熒光顯微鏡下評估轉染效率,實時熒光定量PCR法檢測FMNL3基因的榦擾效率,MTT實驗檢測FMNL3基因沉默前後SW620細胞生長和增殖情況,Transwell小室法檢測榦擾前後細胞的體外侵襲能力變化.結果 各組轉染效率分彆為scramble組 (74.35±5.93)%,shRNA1組(72.33±7.65)%,shRNA2組(73.17±4.32)%,差異無統計學意義(P>0.05);與NC組相比,轉染48 h各組細胞中FMNL3 mRNA錶達水平分彆為scramble 組(93.35±6.33)%,shRNA1組(16.44±4.37)%,shRNA2組(18.51±5.16)%,兩箇shRNA組細胞FMNL3 mRNA錶達水平顯著下調,其中shRNA1組下調最多,榦擾效率最高;與NC組和scramble組細胞相比,shRNA1和shRNA2組細胞48 h和72 h體外增殖活力明顯下降(均P<0.05),其48 h穿齣Transwell小室人工基底膜的細胞數明顯減少(P<0.01).結論 下調FMNL3基因錶達後,結直腸癌SW620細胞的體外增殖和體外侵襲能力均明顯下降,FMNL3可能正嚮調控結直腸癌細胞的增殖和侵襲.
목적 탐토하조FMNL3기인표체대SW620세포체외증식화침습능력적영향.방법 용지질체전염법장FMNL3간우질립pcDNA3.1-EGFP-FMNL3-shRNA1(shRNA1조)화pcDNA3.1-EGFP-FMNL3-shRNA2(shRNA2조)전염결직장암SW620세포,이무관서렬(pcDNA3.1-EGFP-FMNL3-scramble)전염위음성대조(scramble조),이미전염질립적SW620위정상대조(NC조).형광현미경하평고전염효솔,실시형광정량PCR법검측FMNL3기인적간우효솔,MTT실험검측FMNL3기인침묵전후SW620세포생장화증식정황,Transwell소실법검측간우전후세포적체외침습능력변화.결과 각조전염효솔분별위scramble조 (74.35±5.93)%,shRNA1조(72.33±7.65)%,shRNA2조(73.17±4.32)%,차이무통계학의의(P>0.05);여NC조상비,전염48 h각조세포중FMNL3 mRNA표체수평분별위scramble 조(93.35±6.33)%,shRNA1조(16.44±4.37)%,shRNA2조(18.51±5.16)%,량개shRNA조세포FMNL3 mRNA표체수평현저하조,기중shRNA1조하조최다,간우효솔최고;여NC조화scramble조세포상비,shRNA1화shRNA2조세포48 h화72 h체외증식활력명현하강(균P<0.05),기48 h천출Transwell소실인공기저막적세포수명현감소(P<0.01).결론 하조FMNL3기인표체후,결직장암SW620세포적체외증식화체외침습능력균명현하강,FMNL3가능정향조공결직장암세포적증식화침습.
