西北植物学报
西北植物學報
서북식물학보
ACTA BOTANICA BOREALI-OCCIDENTALIA SINICA
2013年
8期
1521-1527
,共7页
野生茄‘托鲁巴姆’%黄萎病%抑制差减杂交文库
野生茄‘託魯巴姆’%黃萎病%抑製差減雜交文庫
야생가‘탁로파모’%황위병%억제차감잡교문고
Solanum torvum%Verticillium wilt%suppression subtractive hybridization library
由大丽轮枝菌(Verticillium dahliae Kleb.)引起的茄子黄萎病是一种严重的土传病害,但在茄子栽培品种中缺少高抗种质,野生茄‘托鲁巴姆’高抗黄萎病.为探讨野生茄‘托鲁巴姆’抗黄萎病的分子机制,该试验以‘托鲁巴姆’为试材,利用抑制性差减杂交技术,分别以黄萎病菌侵染与未侵染的根系为检测方(tester)和驱动方(driver),构建了1个黄萎病菌诱导下的根器官正向差减cDNA文库.结果表明:(1)随机挑取170个阳性克隆,经测序,共获得109个非冗余EST,其中61个EST与其他植物的抗逆相关基因同源,如几丁质酶、细胞色素P450、过氧化物酶、蛋白酶抑制子等.(2)借助NCBI中的EST序列,经过电子拼接结合RT-PCR验证,克隆了1个通用胁迫蛋白基因——StUSP1.(3)表达分析结果显示,‘托鲁巴姆’受黄萎病菌侵染后,StUSP1在根中上调表达.
由大麗輪枝菌(Verticillium dahliae Kleb.)引起的茄子黃萎病是一種嚴重的土傳病害,但在茄子栽培品種中缺少高抗種質,野生茄‘託魯巴姆’高抗黃萎病.為探討野生茄‘託魯巴姆’抗黃萎病的分子機製,該試驗以‘託魯巴姆’為試材,利用抑製性差減雜交技術,分彆以黃萎病菌侵染與未侵染的根繫為檢測方(tester)和驅動方(driver),構建瞭1箇黃萎病菌誘導下的根器官正嚮差減cDNA文庫.結果錶明:(1)隨機挑取170箇暘性剋隆,經測序,共穫得109箇非冗餘EST,其中61箇EST與其他植物的抗逆相關基因同源,如幾丁質酶、細胞色素P450、過氧化物酶、蛋白酶抑製子等.(2)藉助NCBI中的EST序列,經過電子拼接結閤RT-PCR驗證,剋隆瞭1箇通用脅迫蛋白基因——StUSP1.(3)錶達分析結果顯示,‘託魯巴姆’受黃萎病菌侵染後,StUSP1在根中上調錶達.
유대려륜지균(Verticillium dahliae Kleb.)인기적가자황위병시일충엄중적토전병해,단재가자재배품충중결소고항충질,야생가‘탁로파모’고항황위병.위탐토야생가‘탁로파모’항황위병적분자궤제,해시험이‘탁로파모’위시재,이용억제성차감잡교기술,분별이황위병균침염여미침염적근계위검측방(tester)화구동방(driver),구건료1개황위병균유도하적근기관정향차감cDNA문고.결과표명:(1)수궤도취170개양성극륭,경측서,공획득109개비용여EST,기중61개EST여기타식물적항역상관기인동원,여궤정질매、세포색소P450、과양화물매、단백매억제자등.(2)차조NCBI중적EST서렬,경과전자병접결합RT-PCR험증,극륭료1개통용협박단백기인——StUSP1.(3)표체분석결과현시,‘탁로파모’수황위병균침염후,StUSP1재근중상조표체.
