中国抗生素杂志
中國抗生素雜誌
중국항생소잡지
CHINESE JOURNAL OF ANTIBIOTICS
2014年
3期
193-197
,共5页
盖忆青%朱丽%陈代杰%张怡轩
蓋憶青%硃麗%陳代傑%張怡軒
개억청%주려%진대걸%장이헌
东方拟无枝酸菌%attB%eGFP
東方擬無枝痠菌%attB%eGFP
동방의무지산균%attB%eGFP
Amycolatopsis orientalis%attB%eGFP
目的 在万古霉素产生菌东方拟无枝酸菌HCCB 10007内构建attB整合位点,将噬菌体ΦC31重组酶介导的位点特异性整合系统引入该菌,从而提高该工业菌株的遗传操作效率.方法 在不破坏结构基因的情况下经同源重组将来源于变铅青链霉菌的attB编码序列插入到东方拟无枝酸菌HCCB 10007基因组中,然后将带有绿色荧光蛋白基因(eGFP)的特异性位点重组质粒pLYGYQ2导入该工程菌中.用于验证整合系统的有效性.结果 获得基因组中整合有attB位点的基因工程菌LYGYQA.eGFP 基因顺利整合入所构建的attB位点,并且获得了表达.同时发现该系统的整合效率较同源重组效率提高了约3倍.结论 本研究不但表明来源于链霉菌的位点特异性整合系统可以成功应用于东方拟无枝酸菌中,也证明绿色荧光蛋白基因可以作为报告基因用于该菌的研究.
目的 在萬古黴素產生菌東方擬無枝痠菌HCCB 10007內構建attB整閤位點,將噬菌體ΦC31重組酶介導的位點特異性整閤繫統引入該菌,從而提高該工業菌株的遺傳操作效率.方法 在不破壞結構基因的情況下經同源重組將來源于變鉛青鏈黴菌的attB編碼序列插入到東方擬無枝痠菌HCCB 10007基因組中,然後將帶有綠色熒光蛋白基因(eGFP)的特異性位點重組質粒pLYGYQ2導入該工程菌中.用于驗證整閤繫統的有效性.結果 穫得基因組中整閤有attB位點的基因工程菌LYGYQA.eGFP 基因順利整閤入所構建的attB位點,併且穫得瞭錶達.同時髮現該繫統的整閤效率較同源重組效率提高瞭約3倍.結論 本研究不但錶明來源于鏈黴菌的位點特異性整閤繫統可以成功應用于東方擬無枝痠菌中,也證明綠色熒光蛋白基因可以作為報告基因用于該菌的研究.
목적 재만고매소산생균동방의무지산균HCCB 10007내구건attB정합위점,장서균체ΦC31중조매개도적위점특이성정합계통인입해균,종이제고해공업균주적유전조작효솔.방법 재불파배결구기인적정황하경동원중조장래원우변연청련매균적attB편마서렬삽입도동방의무지산균HCCB 10007기인조중,연후장대유록색형광단백기인(eGFP)적특이성위점중조질립pLYGYQ2도입해공정균중.용우험증정합계통적유효성.결과 획득기인조중정합유attB위점적기인공정균LYGYQA.eGFP 기인순리정합입소구건적attB위점,병차획득료표체.동시발현해계통적정합효솔교동원중조효솔제고료약3배.결론 본연구불단표명래원우련매균적위점특이성정합계통가이성공응용우동방의무지산균중,야증명록색형광단백기인가이작위보고기인용우해균적연구.
