中国病理生理杂志
中國病理生理雜誌
중국병리생리잡지
CHINESE JOURNAL OF PATHOPHYSIOLOGY
2014年
5期
876-880
,共5页
朱晓彤%杨瑞%周露婷%张晔%李玲%章卫平%施广霞%陈玉霞
硃曉彤%楊瑞%週露婷%張曄%李玲%章衛平%施廣霞%陳玉霞
주효동%양서%주로정%장엽%리령%장위평%시엄하%진옥하
含锌指和BTB区蛋白20%重组腺病毒%甲胎蛋白类%转录调节
含鋅指和BTB區蛋白20%重組腺病毒%甲胎蛋白類%轉錄調節
함자지화BTB구단백20%중조선병독%갑태단백류%전록조절
Zinc finger and BTB domain containing 20%Recombinant adenovirus%Alpha-fetoproteins%Transcription regulation
目的:构建含锌指蛋白ZBTB20基因的重组腺病毒载体,以研究锌指蛋白ZBTB20的生物学功能.方法:将带有FLAG标签的ZBTB20 cDNA片段(ZBTB20-FLAG)克隆至pAdTrack-CMV载体,将该载体与pAdEasy质粒进行细菌内同源重组从而获得重组腺病毒载体pAd-ZBTB20,之后在293细胞中进行包装以及扩增,并对病毒滴度进行检测;采用肝脏组织特异性ZBTB20基因敲除小鼠的原代肝细胞和肝脏组织模型,分别于离体和在体水平鉴定所制备的重组腺病毒Ad-ZBTB20介导的ZBTB20蛋白表达情况;并采用报告基因技术检测过表达的ZBTB20蛋白的功能活性.结果:成功制备了锌指蛋白ZBTB20重组腺病毒,该重组腺病毒感染原代肝细胞和小鼠肝脏组织能过表达ZBTB20蛋白,并且此ZBTB20蛋白能抑制其下游靶基因甲胎蛋白的转录.结论:所构建的ZBTB20重组腺病毒可以介导ZBTB20的过表达并具备转录调节活性,为今后研究ZBTB20的相关生物学功能奠定了基础.
目的:構建含鋅指蛋白ZBTB20基因的重組腺病毒載體,以研究鋅指蛋白ZBTB20的生物學功能.方法:將帶有FLAG標籤的ZBTB20 cDNA片段(ZBTB20-FLAG)剋隆至pAdTrack-CMV載體,將該載體與pAdEasy質粒進行細菌內同源重組從而穫得重組腺病毒載體pAd-ZBTB20,之後在293細胞中進行包裝以及擴增,併對病毒滴度進行檢測;採用肝髒組織特異性ZBTB20基因敲除小鼠的原代肝細胞和肝髒組織模型,分彆于離體和在體水平鑒定所製備的重組腺病毒Ad-ZBTB20介導的ZBTB20蛋白錶達情況;併採用報告基因技術檢測過錶達的ZBTB20蛋白的功能活性.結果:成功製備瞭鋅指蛋白ZBTB20重組腺病毒,該重組腺病毒感染原代肝細胞和小鼠肝髒組織能過錶達ZBTB20蛋白,併且此ZBTB20蛋白能抑製其下遊靶基因甲胎蛋白的轉錄.結論:所構建的ZBTB20重組腺病毒可以介導ZBTB20的過錶達併具備轉錄調節活性,為今後研究ZBTB20的相關生物學功能奠定瞭基礎.
목적:구건함자지단백ZBTB20기인적중조선병독재체,이연구자지단백ZBTB20적생물학공능.방법:장대유FLAG표첨적ZBTB20 cDNA편단(ZBTB20-FLAG)극륭지pAdTrack-CMV재체,장해재체여pAdEasy질립진행세균내동원중조종이획득중조선병독재체pAd-ZBTB20,지후재293세포중진행포장이급확증,병대병독적도진행검측;채용간장조직특이성ZBTB20기인고제소서적원대간세포화간장조직모형,분별우리체화재체수평감정소제비적중조선병독Ad-ZBTB20개도적ZBTB20단백표체정황;병채용보고기인기술검측과표체적ZBTB20단백적공능활성.결과:성공제비료자지단백ZBTB20중조선병독,해중조선병독감염원대간세포화소서간장조직능과표체ZBTB20단백,병차차ZBTB20단백능억제기하유파기인갑태단백적전록.결론:소구건적ZBTB20중조선병독가이개도ZBTB20적과표체병구비전록조절활성,위금후연구ZBTB20적상관생물학공능전정료기출.
