中国病理生理杂志
中國病理生理雜誌
중국병리생리잡지
CHINESE JOURNAL OF PATHOPHYSIOLOGY
2014年
5期
837-841
,共5页
曹冬青%刘小妮%徐海艳%陶然%黄莺%金惠铭%王睿%卢宁
曹鼕青%劉小妮%徐海豔%陶然%黃鶯%金惠銘%王睿%盧寧
조동청%류소니%서해염%도연%황앵%금혜명%왕예%로저
内源性硫化氢%神经元%血管紧张索Ⅱ%活性氧簇
內源性硫化氫%神經元%血管緊張索Ⅱ%活性氧簇
내원성류화경%신경원%혈관긴장색Ⅱ%활성양족
Endogenous hydrogen sulfide%Neurons%Angiotensin Ⅱ%Reactive oxygen species
目的:探讨内源性硫化氢(H2S)对血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)引起的延髓神经元活性氧(ROS)水平升高的作用及其可能机制.方法:首先培养原代延髓神经元;免疫荧光双标法鉴定神经元及内源性H2S生成酶胱硫醚β-合成酶(CBS)在神经元的表达;同时或单独给予Ang Ⅱ(1μmol/L)和丁酸钠(NaBu,一种CBS激动剂;100μmol/L、250 μmol/L和500 μmol/L),二氢乙啶荧光探针法测定ROS水平;采用总超氧化物歧化酶(SOD)活性检测试剂盒观察总SOD的活性;real-time PCR观察CBS mRNA的表达.结果:(1)原代培养的90％以上的细胞为神经元,Ang Ⅱ(1μmol/L)升高延髓神经元ROS水平;(2)AngⅡ抑制神经元总SOD的活性;(3)荧光双标显示CBS在延髓神经元有表达,Ang Ⅱ可降低CBS mRNA的表达;(4) NaBu(250 μmol/L和500μmol/L)显著抑制AngⅡ引起的ROS水平的升高,且呈剂量依赖性效应.而NaBu单独对延髓神经元ROS水平作用不明显.结论:AngⅡ引起的延髓神经元ROS水平升高至少部分是通过降低总SOD的活性和CBS mRNA的表达而实现的;而内源性H2S可能通过机反的作用抑制这一过程.
目的:探討內源性硫化氫(H2S)對血管緊張素Ⅱ(Ang Ⅱ)引起的延髓神經元活性氧(ROS)水平升高的作用及其可能機製.方法:首先培養原代延髓神經元;免疫熒光雙標法鑒定神經元及內源性H2S生成酶胱硫醚β-閤成酶(CBS)在神經元的錶達;同時或單獨給予Ang Ⅱ(1μmol/L)和丁痠鈉(NaBu,一種CBS激動劑;100μmol/L、250 μmol/L和500 μmol/L),二氫乙啶熒光探針法測定ROS水平;採用總超氧化物歧化酶(SOD)活性檢測試劑盒觀察總SOD的活性;real-time PCR觀察CBS mRNA的錶達.結果:(1)原代培養的90％以上的細胞為神經元,Ang Ⅱ(1μmol/L)升高延髓神經元ROS水平;(2)AngⅡ抑製神經元總SOD的活性;(3)熒光雙標顯示CBS在延髓神經元有錶達,Ang Ⅱ可降低CBS mRNA的錶達;(4) NaBu(250 μmol/L和500μmol/L)顯著抑製AngⅡ引起的ROS水平的升高,且呈劑量依賴性效應.而NaBu單獨對延髓神經元ROS水平作用不明顯.結論:AngⅡ引起的延髓神經元ROS水平升高至少部分是通過降低總SOD的活性和CBS mRNA的錶達而實現的;而內源性H2S可能通過機反的作用抑製這一過程.
목적:탐토내원성류화경(H2S)대혈관긴장소Ⅱ(Ang Ⅱ)인기적연수신경원활성양(ROS)수평승고적작용급기가능궤제.방법:수선배양원대연수신경원;면역형광쌍표법감정신경원급내원성H2S생성매광류미β-합성매(CBS)재신경원적표체;동시혹단독급여Ang Ⅱ(1μmol/L)화정산납(NaBu,일충CBS격동제;100μmol/L、250 μmol/L화500 μmol/L),이경을정형광탐침법측정ROS수평;채용총초양화물기화매(SOD)활성검측시제합관찰총SOD적활성;real-time PCR관찰CBS mRNA적표체.결과:(1)원대배양적90％이상적세포위신경원,Ang Ⅱ(1μmol/L)승고연수신경원ROS수평;(2)AngⅡ억제신경원총SOD적활성;(3)형광쌍표현시CBS재연수신경원유표체,Ang Ⅱ가강저CBS mRNA적표체;(4) NaBu(250 μmol/L화500μmol/L)현저억제AngⅡ인기적ROS수평적승고,차정제량의뢰성효응.이NaBu단독대연수신경원ROS수평작용불명현.결론:AngⅡ인기적연수신경원ROS수평승고지소부분시통과강저총SOD적활성화CBS mRNA적표체이실현적;이내원성H2S가능통과궤반적작용억제저일과정.
