中国病理生理杂志
中國病理生理雜誌
중국병리생리잡지
CHINESE JOURNAL OF PATHOPHYSIOLOGY
2014年
5期
798-803
,共6页
张庆燕%赵慧%罗文%张吉翔
張慶燕%趙慧%囉文%張吉翔
장경연%조혜%라문%장길상
肝肿瘤%着色性干皮病D组蛋白%视网膜母细胞瘤蛋白%有丝分裂阻滞缺陷蛋白2%细胞增殖%细胞凋亡
肝腫瘤%著色性榦皮病D組蛋白%視網膜母細胞瘤蛋白%有絲分裂阻滯缺陷蛋白2%細胞增殖%細胞凋亡
간종류%착색성간피병D조단백%시망막모세포류단백%유사분렬조체결함단백2%세포증식%세포조망
Liver neoplasms%Xeroderma pigmentosum group D protein%Retinoblastoma protein%Mitotic arrest deficient 2 protein%Cell proliferation%Apoptosis
目的:探讨人剪切修复基因着色性干皮病D组基因(xeroderma pigmentosum group D,XPD)转染人肝癌HepG2细胞后视网膜母细胞瘤蛋白(retinoblastoma,Rb)和有丝分裂阻滞缺陷蛋白2(mitotic arrest deficient 2,MAD2)表达的变化及对细胞增殖的影响.方法:将人工合成的pEGFP-N2-XPD重组质粒通过LipofectamineTM2000转染HepG2细胞.实验分为4组,分别为无转染HepG2细胞组(空白对照组)、脂质体转染HepG2细胞组(脂质体组)、空载质粒pEGFP-N2转染细胞组(N2组)和重组质粒pEGFP-N2-XPD转染细胞组(XPD组).分别用RT-PCR和Wesrn blotting法检测各组细胞中XPD、Rb及MAD2 mRNA和蛋白的表达量,用MTT法检测各组细胞的增殖活力,流式细胞术检测各组的细胞凋亡情况及细胞周期.结果:与其它3组相比,XPD组XPD mRNA及蛋白表达量明显升高(P＜0.05),Rb mRNA及蛋白表达量明显升高(P＜0.05),而MAD2 mRNA及蛋白表达量显著降低(P＜0.05).XPD组细胞增殖活力显著降低,细胞凋亡率明显升高(P＜0.05).XPD组细胞停滞在G1期,难以进入S期.结论:XPD可以抑制MAD2的表达和肝癌细胞的增殖,促进Rb的表达.
目的:探討人剪切脩複基因著色性榦皮病D組基因(xeroderma pigmentosum group D,XPD)轉染人肝癌HepG2細胞後視網膜母細胞瘤蛋白(retinoblastoma,Rb)和有絲分裂阻滯缺陷蛋白2(mitotic arrest deficient 2,MAD2)錶達的變化及對細胞增殖的影響.方法:將人工閤成的pEGFP-N2-XPD重組質粒通過LipofectamineTM2000轉染HepG2細胞.實驗分為4組,分彆為無轉染HepG2細胞組(空白對照組)、脂質體轉染HepG2細胞組(脂質體組)、空載質粒pEGFP-N2轉染細胞組(N2組)和重組質粒pEGFP-N2-XPD轉染細胞組(XPD組).分彆用RT-PCR和Wesrn blotting法檢測各組細胞中XPD、Rb及MAD2 mRNA和蛋白的錶達量,用MTT法檢測各組細胞的增殖活力,流式細胞術檢測各組的細胞凋亡情況及細胞週期.結果:與其它3組相比,XPD組XPD mRNA及蛋白錶達量明顯升高(P＜0.05),Rb mRNA及蛋白錶達量明顯升高(P＜0.05),而MAD2 mRNA及蛋白錶達量顯著降低(P＜0.05).XPD組細胞增殖活力顯著降低,細胞凋亡率明顯升高(P＜0.05).XPD組細胞停滯在G1期,難以進入S期.結論:XPD可以抑製MAD2的錶達和肝癌細胞的增殖,促進Rb的錶達.
목적:탐토인전절수복기인착색성간피병D조기인(xeroderma pigmentosum group D,XPD)전염인간암HepG2세포후시망막모세포류단백(retinoblastoma,Rb)화유사분렬조체결함단백2(mitotic arrest deficient 2,MAD2)표체적변화급대세포증식적영향.방법:장인공합성적pEGFP-N2-XPD중조질립통과LipofectamineTM2000전염HepG2세포.실험분위4조,분별위무전염HepG2세포조(공백대조조)、지질체전염HepG2세포조(지질체조)、공재질립pEGFP-N2전염세포조(N2조)화중조질립pEGFP-N2-XPD전염세포조(XPD조).분별용RT-PCR화Wesrn blotting법검측각조세포중XPD、Rb급MAD2 mRNA화단백적표체량,용MTT법검측각조세포적증식활력,류식세포술검측각조적세포조망정황급세포주기.결과:여기타3조상비,XPD조XPD mRNA급단백표체량명현승고(P＜0.05),Rb mRNA급단백표체량명현승고(P＜0.05),이MAD2 mRNA급단백표체량현저강저(P＜0.05).XPD조세포증식활력현저강저,세포조망솔명현승고(P＜0.05).XPD조세포정체재G1기,난이진입S기.결론:XPD가이억제MAD2적표체화간암세포적증식,촉진Rb적표체.
