中国实验方剂学杂志
中國實驗方劑學雜誌
중국실험방제학잡지
CHINESE JOURNAL OF EXPERIMENTAL TRADITIONAL MEDICAL FORMULAE
2014年
12期
183-187
,共5页
程崑%韩伟佳%王玉%李立波%李涛
程崑%韓偉佳%王玉%李立波%李濤
정곤%한위가%왕옥%리립파%리도
蹄叶橐吾醇化乙酸乙酯萃取物%c-Jun氨基末端激酶%抗炎机制%炎症通路
蹄葉橐吾醇化乙痠乙酯萃取物%c-Jun氨基末耑激酶%抗炎機製%炎癥通路
제협탁오순화을산을지췌취물%c-Jun안기말단격매%항염궤제%염증통로
Ligularia fischeri alcoholized ethyl acetate extract%c-Jun N-terminal kinase%anti-inflammatory mechanism%inflammatory pathway
目的:通过c-Jun氨基末端激酶(c-jun N-terminal kinase,JNK)信号通路来研究蹄叶橐吾醇化乙酸乙酯萃取物的抗炎作用机制.方法:采用噻唑蓝比色法(MTT法)测定倍比稀释的蹄叶橐吾醇化乙酸乙酯萃取物(浓度区间为0～ 640 mg·L-1)作用于密度为5×104个/mL的RAW264.7细胞24 h后的细胞活力,计算出药物对细胞的无毒浓度;测定JNK抑制剂SP600125(终浓度分别为25,12.5,6.25 μmol·L-)作用于细胞密度为5 ×104个/mL的RAW264.7细胞24 h后的细胞活力,计算出SP600125作用的安全有效浓度;测定蹄叶橐吾醇化乙酸乙酯萃取物(终质量浓度分别为5,2.5,1 mg·L-1)作用于LPS诱导细胞密度为5×104个/mL的RAW264.7细胞12,24,36,48 h后的细胞活力,计算出药物抑制细胞增殖的浓度.采用蛋白质印迹(Western-blot)法测定蹄叶橐吾醇化乙酸乙酯萃取物(5 mg·L-1)作用于LPS诱导的RAW264.7细胞24 h后p-JNK(磷酸化c-Jun氨基末端激酶)蛋白、JNK蛋白和环氧化酶-2(COX-2)蛋白的表达变化.结果:蹄叶橐吾醇化乙酸乙酯萃取物作用于LPS诱导的RAW264.7细胞,测定p-JNK,JNK,COX-2相对灰度值分别为:0.12±0.03,0.48±0.03,0.18±0.04,无药物作用的LPS诱导的RAW264.7细胞,测定p-JNK,JNK,COX-2,相对灰度值分别为:0.68±0.05,0.83±0.04,0.58±0.04,两组数据比较具有明显差异(P＜0.01).蹄叶橐吾醇化乙酸乙酯萃取物抑制LPS诱导的RAW264.7细胞增殖,下调p-JNK,JNK,COX-2等炎性蛋白的表达.结论:蹄叶橐吾醇化乙酸乙酯萃取物抗炎机制通过JNK信号通路来完成.
目的:通過c-Jun氨基末耑激酶(c-jun N-terminal kinase,JNK)信號通路來研究蹄葉橐吾醇化乙痠乙酯萃取物的抗炎作用機製.方法:採用噻唑藍比色法(MTT法)測定倍比稀釋的蹄葉橐吾醇化乙痠乙酯萃取物(濃度區間為0～ 640 mg·L-1)作用于密度為5×104箇/mL的RAW264.7細胞24 h後的細胞活力,計算齣藥物對細胞的無毒濃度;測定JNK抑製劑SP600125(終濃度分彆為25,12.5,6.25 μmol·L-)作用于細胞密度為5 ×104箇/mL的RAW264.7細胞24 h後的細胞活力,計算齣SP600125作用的安全有效濃度;測定蹄葉橐吾醇化乙痠乙酯萃取物(終質量濃度分彆為5,2.5,1 mg·L-1)作用于LPS誘導細胞密度為5×104箇/mL的RAW264.7細胞12,24,36,48 h後的細胞活力,計算齣藥物抑製細胞增殖的濃度.採用蛋白質印跡(Western-blot)法測定蹄葉橐吾醇化乙痠乙酯萃取物(5 mg·L-1)作用于LPS誘導的RAW264.7細胞24 h後p-JNK(燐痠化c-Jun氨基末耑激酶)蛋白、JNK蛋白和環氧化酶-2(COX-2)蛋白的錶達變化.結果:蹄葉橐吾醇化乙痠乙酯萃取物作用于LPS誘導的RAW264.7細胞,測定p-JNK,JNK,COX-2相對灰度值分彆為:0.12±0.03,0.48±0.03,0.18±0.04,無藥物作用的LPS誘導的RAW264.7細胞,測定p-JNK,JNK,COX-2,相對灰度值分彆為:0.68±0.05,0.83±0.04,0.58±0.04,兩組數據比較具有明顯差異(P＜0.01).蹄葉橐吾醇化乙痠乙酯萃取物抑製LPS誘導的RAW264.7細胞增殖,下調p-JNK,JNK,COX-2等炎性蛋白的錶達.結論:蹄葉橐吾醇化乙痠乙酯萃取物抗炎機製通過JNK信號通路來完成.
목적:통과c-Jun안기말단격매(c-jun N-terminal kinase,JNK)신호통로래연구제협탁오순화을산을지췌취물적항염작용궤제.방법:채용새서람비색법(MTT법)측정배비희석적제협탁오순화을산을지췌취물(농도구간위0～ 640 mg·L-1)작용우밀도위5×104개/mL적RAW264.7세포24 h후적세포활력,계산출약물대세포적무독농도;측정JNK억제제SP600125(종농도분별위25,12.5,6.25 μmol·L-)작용우세포밀도위5 ×104개/mL적RAW264.7세포24 h후적세포활력,계산출SP600125작용적안전유효농도;측정제협탁오순화을산을지췌취물(종질량농도분별위5,2.5,1 mg·L-1)작용우LPS유도세포밀도위5×104개/mL적RAW264.7세포12,24,36,48 h후적세포활력,계산출약물억제세포증식적농도.채용단백질인적(Western-blot)법측정제협탁오순화을산을지췌취물(5 mg·L-1)작용우LPS유도적RAW264.7세포24 h후p-JNK(린산화c-Jun안기말단격매)단백、JNK단백화배양화매-2(COX-2)단백적표체변화.결과:제협탁오순화을산을지췌취물작용우LPS유도적RAW264.7세포,측정p-JNK,JNK,COX-2상대회도치분별위:0.12±0.03,0.48±0.03,0.18±0.04,무약물작용적LPS유도적RAW264.7세포,측정p-JNK,JNK,COX-2,상대회도치분별위:0.68±0.05,0.83±0.04,0.58±0.04,량조수거비교구유명현차이(P＜0.01).제협탁오순화을산을지췌취물억제LPS유도적RAW264.7세포증식,하조p-JNK,JNK,COX-2등염성단백적표체.결론:제협탁오순화을산을지췌취물항염궤제통과JNK신호통로래완성.
