广州化工
廣州化工
엄주화공
GUANGZHOU CHEMICAL INDUSTRY AND TECHNOLOGY
2013年
19期
74-77
,共4页
促红细胞生成素%TNF-α%CHO-K1%FactorXa
促紅細胞生成素%TNF-α%CHO-K1%FactorXa
촉홍세포생성소%TNF-α%CHO-K1%FactorXa
为了构建一种能快速表达人EPO蛋白的真核表达系统,本研究运用的方法是构建基于TNF-α跨膜段(transmembrane,TM)的pcDNA3.1-TM-FactorXa-EPO真核表达载体.把构建好的载体瞬时转染CHO-K1细胞,用FactorXa消化TM-FactorXa-EPO融合蛋白,rhEPO从FactorXa位点处切割下来,达到高效表达和可控酶切.结果本研究构建的表达系统能高效快速表达人EPO.ELISA检测到转染24h的细胞:经FactorXa酶消化总蛋白,rhEPO浓度为285.21 μg/mL;经FactorXa酶消化胞外rhEPO,rhEPO浓度为298.65μg/mL.
為瞭構建一種能快速錶達人EPO蛋白的真覈錶達繫統,本研究運用的方法是構建基于TNF-α跨膜段(transmembrane,TM)的pcDNA3.1-TM-FactorXa-EPO真覈錶達載體.把構建好的載體瞬時轉染CHO-K1細胞,用FactorXa消化TM-FactorXa-EPO融閤蛋白,rhEPO從FactorXa位點處切割下來,達到高效錶達和可控酶切.結果本研究構建的錶達繫統能高效快速錶達人EPO.ELISA檢測到轉染24h的細胞:經FactorXa酶消化總蛋白,rhEPO濃度為285.21 μg/mL;經FactorXa酶消化胞外rhEPO,rhEPO濃度為298.65μg/mL.
위료구건일충능쾌속표체인EPO단백적진핵표체계통,본연구운용적방법시구건기우TNF-α과막단(transmembrane,TM)적pcDNA3.1-TM-FactorXa-EPO진핵표체재체.파구건호적재체순시전염CHO-K1세포,용FactorXa소화TM-FactorXa-EPO융합단백,rhEPO종FactorXa위점처절할하래,체도고효표체화가공매절.결과본연구구건적표체계통능고효쾌속표체인EPO.ELISA검측도전염24h적세포:경FactorXa매소화총단백,rhEPO농도위285.21 μg/mL;경FactorXa매소화포외rhEPO,rhEPO농도위298.65μg/mL.
