中山大学学报（医学科学版）
中山大學學報（醫學科學版）
중산대학학보（의학과학판）
JOURNAL OF SUN YAT-SEN UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCES)
2013年
6期
811-818
,共8页
子宫内膜癌%RNA干扰%脯氨酸-谷氨酸-亮氨酸富集蛋白1/雌激素受体非基因组活性辅助调节因子%慢病毒
子宮內膜癌%RNA榦擾%脯氨痠-穀氨痠-亮氨痠富集蛋白1/雌激素受體非基因組活性輔助調節因子%慢病毒
자궁내막암%RNA간우%포안산-곡안산-량안산부집단백1/자격소수체비기인조활성보조조절인자%만병독
endometrial carcinoma%RNA interference%PELP1/MNAR%Lenti virus
[目的]构建脯氨酸-谷氨酸-亮氨酸富集蛋白1 (PELP1)基因慢病毒表达载体,研究沉默PELP1/雌激素受体非基因组活性辅助调节因子(PELP1/MNAR)基因表达对子宫内膜癌细胞增殖和周期的作用及机制.[方法]构建合成靶向PELP1/MNAR RNAi慢病毒表达载体,并转染子宫内膜癌Ishikawa细胞,Real-time PCR和western blot检测PELP1/MNARmRNA和蛋白水平的表达.使用普通培养基和加入E2的培养基培养各组细胞,MTT检测各组细胞增殖情况;流式细胞仪检测细胞生长周期情况;Western blot检测ER下游靶基因c-fos,cyclin D1的蛋白表达水平.[结果]成功构建合成靶向PELP1/MNAR RNAi慢病毒表达载体,转染子宫内膜癌Ishikawa细胞,转染后PELP1/MNAR mRNA的表达和蛋白的表达分别下降86％和65％(P＜ 0.05).转染后Ishikawa细胞与对照组相比增殖抑制(P＜0.05),细胞周期G0/G1期细胞比例增加,S期细胞比例减少(P＜ 0.05).加入雌激素后,三组细胞的生长速度加快,细胞S期的比例增加,转染组增殖抑制明显(P＜0.05),S期比例降低(P＜ 0.05).转染组ER下游基因c-fos、cyclin-D1蛋白水平均显著降低(P＜0.05).[结论]在子宫内膜癌细胞中沉默PELP1/MNAR的表达能能抑制细胞生长、使细胞阻滞在G1期,下调ER靶基因蛋白表达,PELP1/MNAR有望成为子宫内膜癌治疗的潜在靶点.
[目的]構建脯氨痠-穀氨痠-亮氨痠富集蛋白1 (PELP1)基因慢病毒錶達載體,研究沉默PELP1/雌激素受體非基因組活性輔助調節因子(PELP1/MNAR)基因錶達對子宮內膜癌細胞增殖和週期的作用及機製.[方法]構建閤成靶嚮PELP1/MNAR RNAi慢病毒錶達載體,併轉染子宮內膜癌Ishikawa細胞,Real-time PCR和western blot檢測PELP1/MNARmRNA和蛋白水平的錶達.使用普通培養基和加入E2的培養基培養各組細胞,MTT檢測各組細胞增殖情況;流式細胞儀檢測細胞生長週期情況;Western blot檢測ER下遊靶基因c-fos,cyclin D1的蛋白錶達水平.[結果]成功構建閤成靶嚮PELP1/MNAR RNAi慢病毒錶達載體,轉染子宮內膜癌Ishikawa細胞,轉染後PELP1/MNAR mRNA的錶達和蛋白的錶達分彆下降86％和65％(P＜ 0.05).轉染後Ishikawa細胞與對照組相比增殖抑製(P＜0.05),細胞週期G0/G1期細胞比例增加,S期細胞比例減少(P＜ 0.05).加入雌激素後,三組細胞的生長速度加快,細胞S期的比例增加,轉染組增殖抑製明顯(P＜0.05),S期比例降低(P＜ 0.05).轉染組ER下遊基因c-fos、cyclin-D1蛋白水平均顯著降低(P＜0.05).[結論]在子宮內膜癌細胞中沉默PELP1/MNAR的錶達能能抑製細胞生長、使細胞阻滯在G1期,下調ER靶基因蛋白錶達,PELP1/MNAR有望成為子宮內膜癌治療的潛在靶點.
[목적]구건포안산-곡안산-량안산부집단백1 (PELP1)기인만병독표체재체,연구침묵PELP1/자격소수체비기인조활성보조조절인자(PELP1/MNAR)기인표체대자궁내막암세포증식화주기적작용급궤제.[방법]구건합성파향PELP1/MNAR RNAi만병독표체재체,병전염자궁내막암Ishikawa세포,Real-time PCR화western blot검측PELP1/MNARmRNA화단백수평적표체.사용보통배양기화가입E2적배양기배양각조세포,MTT검측각조세포증식정황;류식세포의검측세포생장주기정황;Western blot검측ER하유파기인c-fos,cyclin D1적단백표체수평.[결과]성공구건합성파향PELP1/MNAR RNAi만병독표체재체,전염자궁내막암Ishikawa세포,전염후PELP1/MNAR mRNA적표체화단백적표체분별하강86％화65％(P＜ 0.05).전염후Ishikawa세포여대조조상비증식억제(P＜0.05),세포주기G0/G1기세포비례증가,S기세포비례감소(P＜ 0.05).가입자격소후,삼조세포적생장속도가쾌,세포S기적비례증가,전염조증식억제명현(P＜0.05),S기비례강저(P＜ 0.05).전염조ER하유기인c-fos、cyclin-D1단백수평균현저강저(P＜0.05).[결론]재자궁내막암세포중침묵PELP1/MNAR적표체능능억제세포생장、사세포조체재G1기,하조ER파기인단백표체,PELP1/MNAR유망성위자궁내막암치료적잠재파점.
