大连理工大学学报
大連理工大學學報
대련리공대학학보
JOURNAL OF DALIAN UNIVERSITY OF TECHNOLOGY
2013年
2期
176-182
,共7页
袁文杰%陈丽杰%孔亮%孜力汗%任剑刚%白凤武
袁文傑%陳麗傑%孔亮%孜力汗%任劍剛%白鳳武
원문걸%진려걸%공량%자력한%임검강%백봉무
菊粉酶基因%整合表达%Kluyveromyces marxianus%菊芋%乙醇
菊粉酶基因%整閤錶達%Kluyveromyces marxianus%菊芋%乙醇
국분매기인%정합표체%Kluyveromyces marxianus%국우%을순
为提高K luyverom yces marxianus(K.marxianus)发酵菊芋粉生产乙醇过程中的菊粉酶活性,以酿酒酵母rDNA为整合位点,构建菊粉酶基因的整合表达载体pFA6a-rDNA-pgk-inu.经SphⅠ线性化后,采用电击法转化K.marxianus,使表达载体整合到K.marxianus的染色体上.经PCR鉴定的阳性转化子能够分泌菊粉酶且能在无筛选压力下稳定遗传50代.重组菌K/r-2分泌的菊粉酶活力为140 U/mL,比出发菌株提高了80%.以粗菊芋粉生料为底物进行了补料发酵,重组菌株的发酵终点乙醇浓度为76.5 g/L,比出发菌株提高了5 g/L,达到理论转化率的96%.这些研究工作为非粮作物菊芋生产燃料乙醇奠定了基础.
為提高K luyverom yces marxianus(K.marxianus)髮酵菊芋粉生產乙醇過程中的菊粉酶活性,以釀酒酵母rDNA為整閤位點,構建菊粉酶基因的整閤錶達載體pFA6a-rDNA-pgk-inu.經SphⅠ線性化後,採用電擊法轉化K.marxianus,使錶達載體整閤到K.marxianus的染色體上.經PCR鑒定的暘性轉化子能夠分泌菊粉酶且能在無篩選壓力下穩定遺傳50代.重組菌K/r-2分泌的菊粉酶活力為140 U/mL,比齣髮菌株提高瞭80%.以粗菊芋粉生料為底物進行瞭補料髮酵,重組菌株的髮酵終點乙醇濃度為76.5 g/L,比齣髮菌株提高瞭5 g/L,達到理論轉化率的96%.這些研究工作為非糧作物菊芋生產燃料乙醇奠定瞭基礎.
위제고K luyverom yces marxianus(K.marxianus)발효국우분생산을순과정중적국분매활성,이양주효모rDNA위정합위점,구건국분매기인적정합표체재체pFA6a-rDNA-pgk-inu.경SphⅠ선성화후,채용전격법전화K.marxianus,사표체재체정합도K.marxianus적염색체상.경PCR감정적양성전화자능구분비국분매차능재무사선압력하은정유전50대.중조균K/r-2분비적국분매활력위140 U/mL,비출발균주제고료80%.이조국우분생료위저물진행료보료발효,중조균주적발효종점을순농도위76.5 g/L,비출발균주제고료5 g/L,체도이론전화솔적96%.저사연구공작위비량작물국우생산연료을순전정료기출.