石河子大学学报（自然科学版）
石河子大學學報（自然科學版）
석하자대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF SHIHEZI UNIVERSITY (NATURAL SCIENCE)
2013年
3期
271-275
,共5页
苏海娣%梁学超%崔百明%郑银英%王建江%向本春
囌海娣%樑學超%崔百明%鄭銀英%王建江%嚮本春
소해제%량학초%최백명%정은영%왕건강%향본춘
新疆%加工番茄%南方番茄病毒%一步法RT-PCR%检测
新疆%加工番茄%南方番茄病毒%一步法RT-PCR%檢測
신강%가공번가%남방번가병독%일보법RT-PCR%검측
Xinjiang%processing tomato%southern tomato virus(STV)%one-step RT-PCR%detection
在对加工番茄里格87-5进行RNA测序时,我们发现存在南方番茄病毒的基因组序列,序列包含STV除5’末端12 bp和3’末端35 bp的其它全部3390 bp的RNA序列,其中只有5个碱基存在差异(与EF442780相比),说明里格87-5感染了STV.为了快速检测加工番茄品种的病毒感染情况,我们设计了STV特异性的PCR引物STV168F/STV745R,用一步法RT-PCR方法,从里格87-5的总RNA中扩增得到了预期的577 bp的扩增产物,回收、克隆到pGEM-T上,提取质粒经EcoRI酶切鉴定后进行序列测定,与已报道的STV的序列同源性为99％～100％,表明该片段是STV特异性的.运用这项技术调查了20份加工番茄材料,结果显示,有3份材料的全部植株均带毒,13份材料均不带毒,另外4份材料部分带毒.同时,在新疆石河子蔬菜花卉研究所随机采集了加工番茄叶片样品,统计大田检出率约为28％.
在對加工番茄裏格87-5進行RNA測序時,我們髮現存在南方番茄病毒的基因組序列,序列包含STV除5’末耑12 bp和3’末耑35 bp的其它全部3390 bp的RNA序列,其中隻有5箇堿基存在差異(與EF442780相比),說明裏格87-5感染瞭STV.為瞭快速檢測加工番茄品種的病毒感染情況,我們設計瞭STV特異性的PCR引物STV168F/STV745R,用一步法RT-PCR方法,從裏格87-5的總RNA中擴增得到瞭預期的577 bp的擴增產物,迴收、剋隆到pGEM-T上,提取質粒經EcoRI酶切鑒定後進行序列測定,與已報道的STV的序列同源性為99％～100％,錶明該片段是STV特異性的.運用這項技術調查瞭20份加工番茄材料,結果顯示,有3份材料的全部植株均帶毒,13份材料均不帶毒,另外4份材料部分帶毒.同時,在新疆石河子蔬菜花卉研究所隨機採集瞭加工番茄葉片樣品,統計大田檢齣率約為28％.
재대가공번가리격87-5진행RNA측서시,아문발현존재남방번가병독적기인조서렬,서렬포함STV제5’말단12 bp화3’말단35 bp적기타전부3390 bp적RNA서렬,기중지유5개감기존재차이(여EF442780상비),설명리격87-5감염료STV.위료쾌속검측가공번가품충적병독감염정황,아문설계료STV특이성적PCR인물STV168F/STV745R,용일보법RT-PCR방법,종리격87-5적총RNA중확증득도료예기적577 bp적확증산물,회수、극륭도pGEM-T상,제취질립경EcoRI매절감정후진행서렬측정,여이보도적STV적서렬동원성위99％～100％,표명해편단시STV특이성적.운용저항기술조사료20빈가공번가재료,결과현시,유3빈재료적전부식주균대독,13빈재료균불대독,령외4빈재료부분대독.동시,재신강석하자소채화훼연구소수궤채집료가공번가협편양품,통계대전검출솔약위28％.
