西南师范大学学报（自然科学版）
西南師範大學學報（自然科學版）
서남사범대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF SOUTHWEST CHINA NORMAL UNIVERSITY
2013年
11期
95-100
,共6页
黄丽%周荣琼%林洁%谭燕财%马光旭%敖冯虎
黃麗%週榮瓊%林潔%譚燕財%馬光旭%敖馮虎
황려%주영경%림길%담연재%마광욱%오풍호
犬钩虫%内转录间隔区(ITS)%PCR%序列分析
犬鉤蟲%內轉錄間隔區(ITS)%PCR%序列分析
견구충%내전록간격구(ITS)%PCR%서렬분석
Ancylostoma caninum%internal transcribed spacer(ITS)%PCR%sequence analysis
利用聚合酶链式反应(PCR)扩增犬钩虫rDNA的ITS及5.8S序列,然后将PCR扩增产物回收纯化后连接到pMDTM 19-T载体上进行克隆.重组质粒通过菌落PCR鉴定,将阳性重组质粒进行序列测定并且进行序列分析.结果显示,5株犬钩虫荣昌分离株ITS序列的总长为833 bp～834 bp.ITS-1序列总长无差异,但存在个别碱基的差异;5.8S序列总长与序列均无差异;ITS-2序列总长存在差异(221 bp～222 bp).通过与GeneBank上报道的其他钩虫的ITS序列进行相似性分析,发现犬钩虫荣昌分离株(RCF)与犬钩虫广州分离株相似性最高,为99.9％,与美国北海狮弯口属钩口线虫ITS序列的相似性最低,为86.1％.表明ITS可作为分子标记用于犬钩虫种属以及种间的鉴定.该研究结果旨在为今后犬钩虫的分类鉴定、种群遗传关系、分子流行病学调查以及对该病的防治等方面的更深入研究奠定基础.
利用聚閤酶鏈式反應(PCR)擴增犬鉤蟲rDNA的ITS及5.8S序列,然後將PCR擴增產物迴收純化後連接到pMDTM 19-T載體上進行剋隆.重組質粒通過菌落PCR鑒定,將暘性重組質粒進行序列測定併且進行序列分析.結果顯示,5株犬鉤蟲榮昌分離株ITS序列的總長為833 bp～834 bp.ITS-1序列總長無差異,但存在箇彆堿基的差異;5.8S序列總長與序列均無差異;ITS-2序列總長存在差異(221 bp～222 bp).通過與GeneBank上報道的其他鉤蟲的ITS序列進行相似性分析,髮現犬鉤蟲榮昌分離株(RCF)與犬鉤蟲廣州分離株相似性最高,為99.9％,與美國北海獅彎口屬鉤口線蟲ITS序列的相似性最低,為86.1％.錶明ITS可作為分子標記用于犬鉤蟲種屬以及種間的鑒定.該研究結果旨在為今後犬鉤蟲的分類鑒定、種群遺傳關繫、分子流行病學調查以及對該病的防治等方麵的更深入研究奠定基礎.
이용취합매련식반응(PCR)확증견구충rDNA적ITS급5.8S서렬,연후장PCR확증산물회수순화후련접도pMDTM 19-T재체상진행극륭.중조질립통과균락PCR감정,장양성중조질립진행서렬측정병차진행서렬분석.결과현시,5주견구충영창분리주ITS서렬적총장위833 bp～834 bp.ITS-1서렬총장무차이,단존재개별감기적차이;5.8S서렬총장여서렬균무차이;ITS-2서렬총장존재차이(221 bp～222 bp).통과여GeneBank상보도적기타구충적ITS서렬진행상사성분석,발현견구충영창분리주(RCF)여견구충엄주분리주상사성최고,위99.9％,여미국북해사만구속구구선충ITS서렬적상사성최저,위86.1％.표명ITS가작위분자표기용우견구충충속이급충간적감정.해연구결과지재위금후견구충적분류감정、충군유전관계、분자류행병학조사이급대해병적방치등방면적경심입연구전정기출.
