安徽农业科学
安徽農業科學
안휘농업과학
JOURNAL OF ANHUI AGRICULTURAL SCIENCES
2013年
24期
9934-9937,9950
,共5页
曾凡锁%梁楠松%王璇%詹亚光
曾凡鎖%樑楠鬆%王璇%詹亞光
증범쇄%량남송%왕선%첨아광
水曲柳%FmadrmA%基因克隆%序列分析
水麯柳%FmadrmA%基因剋隆%序列分析
수곡류%FmadrmA%기인극륭%서렬분석
Fraxinus mandshurica%FmadrmA%Gene cloning%Sequence analysis
[目的]克隆并分析水曲柳结构域重新甲基化酶(DRM)基因片段.[方法]根据GenBank上已发表的DRM氨基酸序列,采取CODEHOP方法设计合成1对简并引物,采用RT-PCR技术对水曲柳DRM基因进行扩增,将PCR产物与pMD 18-T连接后转化至E.coli JM109感受态细胞,检测阳性克隆,测序并进行序列分析.[结果]克隆得到的DRM基因cDNA序列长802 bp,由267个氨基酸残基组成,命名为FmadrmA.序列比对表明FmadrmA与参考的12个物种的DRM在氨基酸水平上表现出较高的同源性,其与山葡萄、番茄、黄瓜、野草莓、大豆、苜蓿、玉米、烟草、拟南芥、毛果杨、水稻和乌拉尔图小麦的DRM同源性分别为61%、54%、51%、50%、60%、48%、43%、44%、37%、42%、42%和39%.系统进化树分析表明同源的DRM蛋白可大致聚为3类,而水曲柳与其他植物的亲缘关系较远.[结论]该试验成功获得了水曲柳FmadrmA基因片段,并对其进行了同源性分析,为进一步研究结构域重新甲基化酶基因及分析其表达特性奠定了基础.
[目的]剋隆併分析水麯柳結構域重新甲基化酶(DRM)基因片段.[方法]根據GenBank上已髮錶的DRM氨基痠序列,採取CODEHOP方法設計閤成1對簡併引物,採用RT-PCR技術對水麯柳DRM基因進行擴增,將PCR產物與pMD 18-T連接後轉化至E.coli JM109感受態細胞,檢測暘性剋隆,測序併進行序列分析.[結果]剋隆得到的DRM基因cDNA序列長802 bp,由267箇氨基痠殘基組成,命名為FmadrmA.序列比對錶明FmadrmA與參攷的12箇物種的DRM在氨基痠水平上錶現齣較高的同源性,其與山葡萄、番茄、黃瓜、野草莓、大豆、苜蓿、玉米、煙草、擬南芥、毛果楊、水稻和烏拉爾圖小麥的DRM同源性分彆為61%、54%、51%、50%、60%、48%、43%、44%、37%、42%、42%和39%.繫統進化樹分析錶明同源的DRM蛋白可大緻聚為3類,而水麯柳與其他植物的親緣關繫較遠.[結論]該試驗成功穫得瞭水麯柳FmadrmA基因片段,併對其進行瞭同源性分析,為進一步研究結構域重新甲基化酶基因及分析其錶達特性奠定瞭基礎.
[목적]극륭병분석수곡류결구역중신갑기화매(DRM)기인편단.[방법]근거GenBank상이발표적DRM안기산서렬,채취CODEHOP방법설계합성1대간병인물,채용RT-PCR기술대수곡류DRM기인진행확증,장PCR산물여pMD 18-T련접후전화지E.coli JM109감수태세포,검측양성극륭,측서병진행서렬분석.[결과]극륭득도적DRM기인cDNA서렬장802 bp,유267개안기산잔기조성,명명위FmadrmA.서렬비대표명FmadrmA여삼고적12개물충적DRM재안기산수평상표현출교고적동원성,기여산포도、번가、황과、야초매、대두、목숙、옥미、연초、의남개、모과양、수도화오랍이도소맥적DRM동원성분별위61%、54%、51%、50%、60%、48%、43%、44%、37%、42%、42%화39%.계통진화수분석표명동원적DRM단백가대치취위3류,이수곡류여기타식물적친연관계교원.[결론]해시험성공획득료수곡류FmadrmA기인편단,병대기진행료동원성분석,위진일보연구결구역중신갑기화매기인급분석기표체특성전정료기출.