安徽农业科学
安徽農業科學
안휘농업과학
JOURNAL OF ANHUI AGRICULTURAL SCIENCES
2013年
24期
9921-9923
,共3页
李香春%金鑫%朴春宇%金成德%朴春实
李香春%金鑫%樸春宇%金成德%樸春實
리향춘%금흠%박춘우%금성덕%박춘실
气肿疽梭菌%融合基因%SOE-PCR%TD-PCR
氣腫疽梭菌%融閤基因%SOE-PCR%TD-PCR
기종저사균%융합기인%SOE-PCR%TD-PCR
Clostridium chauvoei%Fusion gene%SOE-PCR%TD-PCR
[目的]构建联合表达气肿疽梭菌的鞭毛蛋白与分泌蛋白神经氨酸酶的方法,用以制备气肿疽生物工程亚单位疫苗.[方法]根据已公布的气肿疽梭菌FliA(C)和NanA序列设计引物,联合使用SOE-PCR与TD-PCR技术,建立融合基因FliA(C)-NanA的扩增方法.[结果]试验成功扩增出了融合基因FliA(C)-NanA.[结论]SOE-PCR方法无需在引物设计中加入酶切位点进行连接,降低了试验成本,且2个基因间未加入其他核酸序列,避免了表达出影响免疫效果的蛋白;TD-PCR的应用节省了试验时间,避免了筛选退火温度的繁琐步骤,解决了基因丢失的问题.
[目的]構建聯閤錶達氣腫疽梭菌的鞭毛蛋白與分泌蛋白神經氨痠酶的方法,用以製備氣腫疽生物工程亞單位疫苗.[方法]根據已公佈的氣腫疽梭菌FliA(C)和NanA序列設計引物,聯閤使用SOE-PCR與TD-PCR技術,建立融閤基因FliA(C)-NanA的擴增方法.[結果]試驗成功擴增齣瞭融閤基因FliA(C)-NanA.[結論]SOE-PCR方法無需在引物設計中加入酶切位點進行連接,降低瞭試驗成本,且2箇基因間未加入其他覈痠序列,避免瞭錶達齣影響免疫效果的蛋白;TD-PCR的應用節省瞭試驗時間,避免瞭篩選退火溫度的繁瑣步驟,解決瞭基因丟失的問題.
[목적]구건연합표체기종저사균적편모단백여분비단백신경안산매적방법,용이제비기종저생물공정아단위역묘.[방법]근거이공포적기종저사균FliA(C)화NanA서렬설계인물,연합사용SOE-PCR여TD-PCR기술,건립융합기인FliA(C)-NanA적확증방법.[결과]시험성공확증출료융합기인FliA(C)-NanA.[결론]SOE-PCR방법무수재인물설계중가입매절위점진행련접,강저료시험성본,차2개기인간미가입기타핵산서렬,피면료표체출영향면역효과적단백;TD-PCR적응용절성료시험시간,피면료사선퇴화온도적번쇄보취,해결료기인주실적문제.
