CAJ | 학술논문

人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)种属特异性机制尚不清楚.研究通过检测HCMV AD169体外感染人胚胎成纤维细胞(Human embryo fibroblast,HEF)和小鼠胚胎成纤维细胞(mouse embryo fibroblast,MEF)后病毒基因的表达情况,探讨HCMV种属特异性的可能分子机制.首先用HCMV AD169(MOI=5)分别感染HEF和MEF,相差显微镜逐日观察细胞的形态学变化;RT-PCR检测HCMV即刻早期(IE1、IE2)、早期(UL84)和晚期基因(UL83)的表达情况;Western-blot和免疫荧光检测病毒基因编码蛋白表达的情况.形态学观察发现HEF感染HCMV后逐渐变大变圆并相互融合,第4天可见典型的HCMV特征性病变效应,而MEF则未出现上述的变化;RT-PCR和Western-blot表明HEF组表达即刻早期基因IE1和IE2、早期基因UL84和晚期基因UL83 mRNA以及各基因所编码的蛋白,且相对表达量显著高于模拟感染组(P﹤0.01);而MEF组仅IE1和IE2 mRNA和蛋白相对表达量显著低于HEF组(P﹤0.05),而高于模拟感染组(P﹤0.01).免疫荧光检测发现HEF感染72 h表达IE和UL83蛋白,而MEF则无明显表达.以上结果表明,HCMV不能在MEF中复制并产生完整子代病毒颗粒,且病毒基因表达阻止在IE2基因表达之后和UL84基因表达之前,其种属特异性可能与即刻早期蛋白低水平的表达量有关.
인거세포병독(human cytomegalovirus,HCMV)충속특이성궤제상불청초.연구통과검측HCMV AD169체외감염인배태성섬유세포(Human embryo fibroblast,HEF)화소서배태성섬유세포(mouse embryo fibroblast,MEF)후병독기인적표체정황,탐토HCMV충속특이성적가능분자궤제.수선용HCMV AD169(MOI=5)분별감염HEF화MEF,상차현미경축일관찰세포적형태학변화;RT-PCR검측HCMV즉각조기(IE1、IE2)、조기(UL84)화만기기인(UL83)적표체정황;Western-blot화면역형광검측병독기인편마단백표체적정황.형태학관찰발현HEF감염HCMV후축점변대변원병상호융합,제4천가견전형적HCMV특정성병변효응,이MEF칙미출현상술적변화;RT-PCR화Western-blot표명HEF조표체즉각조기기인IE1화IE2、조기기인UL84화만기기인UL83 mRNA이급각기인소편마적단백,차상대표체량현저고우모의감염조(P﹤0.01);이MEF조부IE1화IE2 mRNA화단백상대표체량현저저우HEF조(P﹤0.05),이고우모의감염조(P﹤0.01).면역형광검측발현HEF감염72 h표체IE화UL83단백,이MEF칙무명현표체.이상결과표명,HCMV불능재MEF중복제병산생완정자대병독과립,차병독기인표체조지재IE2기인표체지후화UL84기인표체지전,기충속특이성가능여즉각조기단백저수평적표체량유관.