中国实验诊断学
中國實驗診斷學
중국실험진단학
CHINESE JOURNAL OF LABORATORY DIAGNOSIS
2013年
11期
1933-1937
,共5页
樊美荣%徐建军%张濛%王兵%张青云
樊美榮%徐建軍%張濛%王兵%張青雲
번미영%서건군%장몽%왕병%장청운
存活素%单克隆抗体%肿瘤%肿瘤细胞
存活素%單剋隆抗體%腫瘤%腫瘤細胞
존활소%단극륭항체%종류%종류세포
目的 表达人Survivin重组蛋白、制备单克隆抗体及检测Survivin在多种肿瘤细胞中的表达.方法 诱导含有pMS-Survivin重组质粒的E.coli.表达人MS2-Survivin重组蛋白,并作为抗原免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞融合,经ELISA双筛,获得稳定分泌抗人Survivin mAb的杂交瘤细胞株.ELISA检测Survivin mAb的特异性.免疫细胞化学检测多种肿瘤细胞中天然Survivin的表达情况.结果 诱导菌在相对分子质量为30 KD左右表达出一新的蛋白条带.筛选出2株稳定分泌特异性抗人Survivin mAb的杂交瘤细胞株,亚类鉴定均为IgG1类.两株单克隆抗体的效价均达到6.4×105.ELISA结果显示出抗人Survivin mAb的特异性.在胃癌细胞、肺癌细胞、宫颈癌细胞中均强表达,且主要在细胞浆中.结论 成功制备出特异性抗人Survivin mAb,为以后应用于临床检测奠定了基础,也为其进一步开发成诊断性试剂盒奠定了基础.
目的 錶達人Survivin重組蛋白、製備單剋隆抗體及檢測Survivin在多種腫瘤細胞中的錶達.方法 誘導含有pMS-Survivin重組質粒的E.coli.錶達人MS2-Survivin重組蛋白,併作為抗原免疫BALB/c小鼠,取其脾細胞與Sp2/0骨髓瘤細胞融閤,經ELISA雙篩,穫得穩定分泌抗人Survivin mAb的雜交瘤細胞株.ELISA檢測Survivin mAb的特異性.免疫細胞化學檢測多種腫瘤細胞中天然Survivin的錶達情況.結果 誘導菌在相對分子質量為30 KD左右錶達齣一新的蛋白條帶.篩選齣2株穩定分泌特異性抗人Survivin mAb的雜交瘤細胞株,亞類鑒定均為IgG1類.兩株單剋隆抗體的效價均達到6.4×105.ELISA結果顯示齣抗人Survivin mAb的特異性.在胃癌細胞、肺癌細胞、宮頸癌細胞中均彊錶達,且主要在細胞漿中.結論 成功製備齣特異性抗人Survivin mAb,為以後應用于臨床檢測奠定瞭基礎,也為其進一步開髮成診斷性試劑盒奠定瞭基礎.
목적 표체인Survivin중조단백、제비단극륭항체급검측Survivin재다충종류세포중적표체.방법 유도함유pMS-Survivin중조질립적E.coli.표체인MS2-Survivin중조단백,병작위항원면역BALB/c소서,취기비세포여Sp2/0골수류세포융합,경ELISA쌍사,획득은정분비항인Survivin mAb적잡교류세포주.ELISA검측Survivin mAb적특이성.면역세포화학검측다충종류세포중천연Survivin적표체정황.결과 유도균재상대분자질량위30 KD좌우표체출일신적단백조대.사선출2주은정분비특이성항인Survivin mAb적잡교류세포주,아류감정균위IgG1류.량주단극륭항체적효개균체도6.4×105.ELISA결과현시출항인Survivin mAb적특이성.재위암세포、폐암세포、궁경암세포중균강표체,차주요재세포장중.결론 성공제비출특이성항인Survivin mAb,위이후응용우림상검측전정료기출,야위기진일보개발성진단성시제합전정료기출.
