中国药理学通报
中國藥理學通報
중국약이학통보
CHINESE PHARMACOLOGICAL BULLETIN
2013年
11期
1610-1613
,共4页
封瑞%于丽凤%胡慧媛%郭凤%龟山正树%郝丽英
封瑞%于麗鳳%鬍慧媛%郭鳳%龜山正樹%郝麗英
봉서%우려봉%호혜원%곽봉%구산정수%학려영
Cav1.2钙通道%蛋白%心肌%豚鼠%亲和层析%表面活性剂
Cav1.2鈣通道%蛋白%心肌%豚鼠%親和層析%錶麵活性劑
Cav1.2개통도%단백%심기%돈서%친화층석%표면활성제
目的 探寻从豚鼠心肌组织中提取纯化全长的心肌Cav1.2钙通道蛋白的实验方法.方法 采用组织匀浆、超高速离心的方法获得溶解状态的Cav1.2钙通道蛋白,使用亲和层析的方法对钙通道蛋白进行进一步的纯化,再应用Western blot技术使用不同的Cav1.2钙通道抗体对所制备的心肌Cav1.2钙通道蛋白进行鉴定.结果 比较CHAPS和Triton X-100的增溶效果,发现去污剂CHAPS能够更好地促进钙通道蛋白的溶解,且浓度为2%CHAPS是能够使钙通道蛋白溶解且不损害钙通道结构的最适浓度;同时,蛋白电泳和免疫印迹结果显示,提取制备所得的蛋白为心肌Cav1.2钙通道蛋白.结论 亲和层析方法提取了纯度较高的全长的心肌Cav1.2钙通道蛋白,为系统研究心肌Cav1.2钙通道奠定了坚实的基础.
目的 探尋從豚鼠心肌組織中提取純化全長的心肌Cav1.2鈣通道蛋白的實驗方法.方法 採用組織勻漿、超高速離心的方法穫得溶解狀態的Cav1.2鈣通道蛋白,使用親和層析的方法對鈣通道蛋白進行進一步的純化,再應用Western blot技術使用不同的Cav1.2鈣通道抗體對所製備的心肌Cav1.2鈣通道蛋白進行鑒定.結果 比較CHAPS和Triton X-100的增溶效果,髮現去汙劑CHAPS能夠更好地促進鈣通道蛋白的溶解,且濃度為2%CHAPS是能夠使鈣通道蛋白溶解且不損害鈣通道結構的最適濃度;同時,蛋白電泳和免疫印跡結果顯示,提取製備所得的蛋白為心肌Cav1.2鈣通道蛋白.結論 親和層析方法提取瞭純度較高的全長的心肌Cav1.2鈣通道蛋白,為繫統研究心肌Cav1.2鈣通道奠定瞭堅實的基礎.
목적 탐심종돈서심기조직중제취순화전장적심기Cav1.2개통도단백적실험방법.방법 채용조직균장、초고속리심적방법획득용해상태적Cav1.2개통도단백,사용친화층석적방법대개통도단백진행진일보적순화,재응용Western blot기술사용불동적Cav1.2개통도항체대소제비적심기Cav1.2개통도단백진행감정.결과 비교CHAPS화Triton X-100적증용효과,발현거오제CHAPS능구경호지촉진개통도단백적용해,차농도위2%CHAPS시능구사개통도단백용해차불손해개통도결구적최괄농도;동시,단백전영화면역인적결과현시,제취제비소득적단백위심기Cav1.2개통도단백.결론 친화층석방법제취료순도교고적전장적심기Cav1.2개통도단백,위계통연구심기Cav1.2개통도전정료견실적기출.