中国现代普通外科进展
中國現代普通外科進展
중국현대보통외과진전
CHINESE JOURNAL OF CURRENT ADVANCES IN GENERAL SURGERY
2012年
12期
929-934
,共6页
杨博%郭晓波%靖昌庆%彭利盼%王金申%石玉龙%李乐平
楊博%郭曉波%靖昌慶%彭利盼%王金申%石玉龍%李樂平
양박%곽효파%정창경%팽리반%왕금신%석옥룡%리악평
胃肿瘤%血管内皮生长因子-C%细胞增殖%克隆形成%小管形成
胃腫瘤%血管內皮生長因子-C%細胞增殖%剋隆形成%小管形成
위종류%혈관내피생장인자-C%세포증식%극륭형성%소관형성
目的:构建人血管内皮生长因子(VEGF)-C基因慢病毒表达载体,并研究其在胃癌细胞中的功能.方法:采用SYBR Green相对定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)及蛋白免疫印迹法(Western blot)检测6种不同类型的胃癌细胞系MKN-45、MKN-28、NCl-N87、BGC-823、AGS和SGC-7901中VEGF-C mRNA及其蛋白表达水平；通过构建VEGF-C基因慢病毒表达载体进行细胞增殖、克隆形成和内皮细胞管形成实验,按实验组(MKN-45-GV/C)、对照组(MKN-45-GV)和空白细胞组(MKN-45)加以比较.结果:qRT-PCR和Western blot实验表明,在6种胃癌细胞中均可检测到VEGF-C mRNA及其蛋白的表达,其中在胃癌细胞MKN-45中表达最低(0.45±1.44),SGC-7901中表达最高(31.13±0.75)；增殖实验结果显示,与对照组比较,实验组细胞增殖数量明显增加(P＜0.001);克隆形成结果显示,实验组和对照组细胞在每平均视野形成克隆数分别为6.23±0.32和1.40±1.67,克隆形成率分别为85％和31％(P＜0.05)；内皮细胞管形成实验结果显示,实验组、对照组和空白细胞组小管数目分别为8.14±1.25、12.76±0.79和18.46±0.72 (P＜0.01),小管长度分别为98.56±3.71、105.17±1.34和151.62±2.51 (P＜0.05).结论:VEGF-C基因真核表达载体构建成功,VEGF-C基因促进胃癌细胞增殖、克隆形成和小管形成.
目的:構建人血管內皮生長因子(VEGF)-C基因慢病毒錶達載體,併研究其在胃癌細胞中的功能.方法:採用SYBR Green相對定量逆轉錄聚閤酶鏈反應(qRT-PCR)及蛋白免疫印跡法(Western blot)檢測6種不同類型的胃癌細胞繫MKN-45、MKN-28、NCl-N87、BGC-823、AGS和SGC-7901中VEGF-C mRNA及其蛋白錶達水平；通過構建VEGF-C基因慢病毒錶達載體進行細胞增殖、剋隆形成和內皮細胞管形成實驗,按實驗組(MKN-45-GV/C)、對照組(MKN-45-GV)和空白細胞組(MKN-45)加以比較.結果:qRT-PCR和Western blot實驗錶明,在6種胃癌細胞中均可檢測到VEGF-C mRNA及其蛋白的錶達,其中在胃癌細胞MKN-45中錶達最低(0.45±1.44),SGC-7901中錶達最高(31.13±0.75)；增殖實驗結果顯示,與對照組比較,實驗組細胞增殖數量明顯增加(P＜0.001);剋隆形成結果顯示,實驗組和對照組細胞在每平均視野形成剋隆數分彆為6.23±0.32和1.40±1.67,剋隆形成率分彆為85％和31％(P＜0.05)；內皮細胞管形成實驗結果顯示,實驗組、對照組和空白細胞組小管數目分彆為8.14±1.25、12.76±0.79和18.46±0.72 (P＜0.01),小管長度分彆為98.56±3.71、105.17±1.34和151.62±2.51 (P＜0.05).結論:VEGF-C基因真覈錶達載體構建成功,VEGF-C基因促進胃癌細胞增殖、剋隆形成和小管形成.
목적:구건인혈관내피생장인자(VEGF)-C기인만병독표체재체,병연구기재위암세포중적공능.방법:채용SYBR Green상대정량역전록취합매련반응(qRT-PCR)급단백면역인적법(Western blot)검측6충불동류형적위암세포계MKN-45、MKN-28、NCl-N87、BGC-823、AGS화SGC-7901중VEGF-C mRNA급기단백표체수평；통과구건VEGF-C기인만병독표체재체진행세포증식、극륭형성화내피세포관형성실험,안실험조(MKN-45-GV/C)、대조조(MKN-45-GV)화공백세포조(MKN-45)가이비교.결과:qRT-PCR화Western blot실험표명,재6충위암세포중균가검측도VEGF-C mRNA급기단백적표체,기중재위암세포MKN-45중표체최저(0.45±1.44),SGC-7901중표체최고(31.13±0.75)；증식실험결과현시,여대조조비교,실험조세포증식수량명현증가(P＜0.001);극륭형성결과현시,실험조화대조조세포재매평균시야형성극륭수분별위6.23±0.32화1.40±1.67,극륭형성솔분별위85％화31％(P＜0.05)；내피세포관형성실험결과현시,실험조、대조조화공백세포조소관수목분별위8.14±1.25、12.76±0.79화18.46±0.72 (P＜0.01),소관장도분별위98.56±3.71、105.17±1.34화151.62±2.51 (P＜0.05).결론:VEGF-C기인진핵표체재체구건성공,VEGF-C기인촉진위암세포증식、극륭형성화소관형성.
