CAJ | 학술논문

人工关节假体磨损颗粒对巨噬细胞游走抑制因子表达的影响
인공관절가체마손과립대거서세포유주억제인자표체적영향
Effect of wear particles from joint prosthesis on the expression of macrophage migration inhibiting factor

万方数据

中医正骨中醫正骨 중의정골
THE JOURNAL OF TRADITIONAL CHINESE ORTHOPEDICS AND TRAUMATOLOGY
2013年 1期 14-18 ,共5页

潘孝云%许心弦%张先龙%毛昕%温宏%张宇

반효운%허심현%장선룡%모흔%온굉%장우

人工关节%巨噬细胞游走抑制因子%NF-κB%动物实验人工關節%巨噬細胞遊走抑製因子%NF-κB%動物實驗
인공관절%거서세포유주억제인자%NF-κB%동물실험

目的:观察人工关节假体磨损颗粒对巨噬细胞游走抑制因子表达的影响.方法:配制钛颗粒悬液,并培养小鼠巨噬细胞.将培养的第3代小鼠巨噬细胞分别进行以下实验:①将细胞分为4组,A组不作任何处理,B组加入浓度为0.01％的钛颗粒；C组加入浓度为0.05％的钛颗粒,D组加入浓度为0.1％的钛颗粒培养24 h后分别用酶联免疫吸附剂测定法和聚合酶链式反应法检测各组的巨噬细胞游走抑制因子蛋白和巨噬细胞游走抑制因子mRNA的含量.②将细胞分2组,对照组不作任何处理,观察组加入浓度为0.1％的钛颗粒.分别在实验开始后0h、6h、12h、24 h和36 h对2组的不同培养孔的细胞用酶联免疫吸附剂测定法和聚合酶链式反应法检测各组的巨噬细胞游走抑制因子蛋白和巨噬细胞游走抑制因子mRNA的含量.③将细胞分为4组,Ⅰ组不作任何处理,Ⅱ组加入浓度为0.1％的钛颗粒,Ⅲ组加入浓度为1 00 μmol· mL-1的吡咯烷二硫代氨基甲酸盐,Ⅳ组先加入浓度为100 μmol·mL-1的吡咯烷二硫代氨基甲酸盐,1h后再加入浓度为0.1％的钛颗粒.培养24 h后用酶联免疫吸附剂测定法检测各组的巨噬细胞游走抑制因子蛋白含量.④将细胞分为2组,a组不作任何处理,b组加入浓度为0.1％的钛颗粒.分别在实验开始后0h、0.5h、1h、3h和6h对2组的不同培养孔的细胞用酶联免疫吸附剂测定法测定磷酸化p65的含量.结果:①钛颗粒浓度对巨噬细胞游走抑制因子表达的影响:各组小鼠巨噬细胞巨噬细胞游走抑制因子蛋白和巨噬细胞游走抑制因子mRNA含量的组间比较,差异均有统计学意义(F=207.158,P=0.000；F=64.955,P=0.000).A组巨噬细胞游走抑制因子蛋白和巨噬细胞游走抑制因子mRNA的含量[(3.93±0.11)ng· mL-1,(0.03±0.01)]与B组[(4.21±0.27)ng· mL-1,(0.10±0.01)]比较,差异无统计学意义(P=0.167;P =0.223)；A组小于C组[(6.56 ±0.27)ng·mL-1,(0.25±0.09)],差异有统计学意义(P=0.000；P=0.004)；A组小于D组[(7.82 ±0.21)ng·mL-1,(0.70 ±0.09)],差异有统计学意义(P =0.000；P=0.000)；B组小于C组(P =0.000；P=0.025)和D组(P=0.000；P=0.000)；C组小于D组(P=0.000;P =0.000).②钛颗粒刺激时间对巨噬细胞游走抑制因子的影响:对照组巨噬细胞游走抑制因子蛋白和巨噬细胞游走抑制因子mRNA含量各时点间比较,差异无统计学意义(F=0.310,P=0.865；F=0.065,P=0.991).观察组巨噬细胞游走抑制因子蛋白和巨噬细胞游走抑制因子mRNA含量各时点间比较,差异有统计学意义(F=32.857,P=0.000;F=15.621,P=0.000),各时点间两两比较:6h时的巨噬细胞游走抑制因子蛋白和巨噬细胞游走抑制因子mRNA表达量[(4.14±0.24)ng· mL-1,(0.08±0.04)]与0 h[(3.60±0.40)ng,mL-1,(0.03±0.01)]比较,差异无统计学意义(P =0.133;P =0.621)；12 h的表达量[(5.61±0.47)ng· mL-1,(0.36±0.21)]大于0h,差异有统计学意义(P =0.000；P=0.004)；24 h的表达量[(7.15 ±0.10)ng· mL-1,(0.71±0.12)]大于12 h,差异有统计学意义(P=0.000;P =0.003)；36 h的表达量[(5.22±0.85)ng·mL-1,(0.31 ±0.18)]小于24 h,差异有统计学意义(P =0.000;P =0.004),但高于0h的表达量(P =0.000；P=0.003).③钛颗粒和吡咯烷二硫代氨基甲酸盐对巨噬细胞表达巨噬细胞游走抑制因子蛋白的影响:实验结束后4组小鼠巨噬细胞的巨噬细胞游走抑制因子蛋白量分别为,Ⅰ组(3.77 ±0.42)ng·mL-1,Ⅱ组(7.59±0.28)ng· mL-1,Ⅲ组(4.23 ±0.42)ng·mL-1,Ⅳ组(6.48±0.5)ng· mL-1 析因方差分析结果提示,单独使用0.1％钛颗粒能促进巨噬细胞表达巨噬细胞游走抑制因子蛋白(F=153.363,P=0.000)；单独使用100 μmol·mL-1的吡咯烷二硫代氨基甲酸盐对巨噬细胞表达巨噬细胞游走抑制因子蛋白无影响(F=1.762,P=0.221)；100 μmol·mL-1的吡咯烷二硫代氨基甲酸盐对0.1％钛颗粒促进巨噬细胞表达巨噬细胞游走抑制因子蛋白具有抑制效应(F=10.325,P=0.012).④钛颗粒浓度对巨噬细胞NF-κB信号通路的影响:a组各时点磷酸化p65含量比较,差异无统计学意义(F=0.248,P=0.904).b组各时点磷酸化p65含量比较,差异有统计学意义(F=30.217,P=0.000),各时点间两两比较:0.5 h磷酸化p65含量[(17.68±0.55)pg·mg-1]高于0 h[(10.38±3.18)pg·mg-1],差异有统计学意义(P =0.005)；1 h磷酸化p65含量[(23.31 ±2.05)pg· mg-1]高于0.5h,差异有统计学意义(P =0.020)；3 h磷酸化p65含量[(31.80±1.84)pg·mg-1]高于1 h,差异有统计学意义(P =0.002)；6 h磷酸化p65含量[(18.42±3.61)pg·mg-1]低于3 h(P =0.000),但高于0 h(P=0.003) 结论:人工关节假体磨损颗粒可通过NF-κB信号通路上调巨噬细胞游走抑制因子的表达,促进假体周围炎症反应,导致假体周围骨吸收、溶解,导致假体无菌性松动.
목적:관찰인공관절가체마손과립대거서세포유주억제인자표체적영향.방법:배제태과립현액,병배양소서거서세포.장배양적제3대소서거서세포분별진행이하실험:①장세포분위4조,A조불작임하처리,B조가입농도위0.01％적태과립；C조가입농도위0.05％적태과립,D조가입농도위0.1％적태과립배양24 h후분별용매련면역흡부제측정법화취합매련식반응법검측각조적거서세포유주억제인자단백화거서세포유주억제인자mRNA적함량.②장세포분2조,대조조불작임하처리,관찰조가입농도위0.1％적태과립.분별재실험개시후0h、6h、12h、24 h화36 h대2조적불동배양공적세포용매련면역흡부제측정법화취합매련식반응법검측각조적거서세포유주억제인자단백화거서세포유주억제인자mRNA적함량.③장세포분위4조,Ⅰ조불작임하처리,Ⅱ조가입농도위0.1％적태과립,Ⅲ조가입농도위1 00 μmol· mL-1적필각완이류대안기갑산염,Ⅳ조선가입농도위100 μmol·mL-1적필각완이류대안기갑산염,1h후재가입농도위0.1％적태과립.배양24 h후용매련면역흡부제측정법검측각조적거서세포유주억제인자단백함량.④장세포분위2조,a조불작임하처리,b조가입농도위0.1％적태과립.분별재실험개시후0h、0.5h、1h、3h화6h대2조적불동배양공적세포용매련면역흡부제측정법측정린산화p65적함량.결과:①태과립농도대거서세포유주억제인자표체적영향:각조소서거서세포거서세포유주억제인자단백화거서세포유주억제인자mRNA함량적조간비교,차이균유통계학의의(F=207.158,P=0.000；F=64.955,P=0.000).A조거서세포유주억제인자단백화거서세포유주억제인자mRNA적함량[(3.93±0.11)ng· mL-1,(0.03±0.01)]여B조[(4.21±0.27)ng· mL-1,(0.10±0.01)]비교,차이무통계학의의(P=0.167;P =0.223)；A조소우C조[(6.56 ±0.27)ng·mL-1,(0.25±0.09)],차이유통계학의의(P=0.000；P=0.004)；A조소우D조[(7.82 ±0.21)ng·mL-1,(0.70 ±0.09)],차이유통계학의의(P =0.000；P=0.000)；B조소우C조(P =0.000；P=0.025)화D조(P=0.000；P=0.000)；C조소우D조(P=0.000;P =0.000).②태과립자격시간대거서세포유주억제인자적영향:대조조거서세포유주억제인자단백화거서세포유주억제인자mRNA함량각시점간비교,차이무통계학의의(F=0.310,P=0.865；F=0.065,P=0.991).관찰조거서세포유주억제인자단백화거서세포유주억제인자mRNA함량각시점간비교,차이유통계학의의(F=32.857,P=0.000;F=15.621,P=0.000),각시점간량량비교:6h시적거서세포유주억제인자단백화거서세포유주억제인자mRNA표체량[(4.14±0.24)ng· mL-1,(0.08±0.04)]여0 h[(3.60±0.40)ng,mL-1,(0.03±0.01)]비교,차이무통계학의의(P =0.133;P =0.621)；12 h적표체량[(5.61±0.47)ng· mL-1,(0.36±0.21)]대우0h,차이유통계학의의(P =0.000；P=0.004)；24 h적표체량[(7.15 ±0.10)ng· mL-1,(0.71±0.12)]대우12 h,차이유통계학의의(P=0.000;P =0.003)；36 h적표체량[(5.22±0.85)ng·mL-1,(0.31 ±0.18)]소우24 h,차이유통계학의의(P =0.000;P =0.004),단고우0h적표체량(P =0.000；P=0.003).③태과립화필각완이류대안기갑산염대거서세포표체거서세포유주억제인자단백적영향:실험결속후4조소서거서세포적거서세포유주억제인자단백량분별위,Ⅰ조(3.77 ±0.42)ng·mL-1,Ⅱ조(7.59±0.28)ng· mL-1,Ⅲ조(4.23 ±0.42)ng·mL-1,Ⅳ조(6.48±0.5)ng· mL-1 석인방차분석결과제시,단독사용0.1％태과립능촉진거서세포표체거서세포유주억제인자단백(F=153.363,P=0.000)；단독사용100 μmol·mL-1적필각완이류대안기갑산염대거서세포표체거서세포유주억제인자단백무영향(F=1.762,P=0.221)；100 μmol·mL-1적필각완이류대안기갑산염대0.1％태과립촉진거서세포표체거서세포유주억제인자단백구유억제효응(F=10.325,P=0.012).④태과립농도대거서세포NF-κB신호통로적영향:a조각시점린산화p65함량비교,차이무통계학의의(F=0.248,P=0.904).b조각시점린산화p65함량비교,차이유통계학의의(F=30.217,P=0.000),각시점간량량비교:0.5 h린산화p65함량[(17.68±0.55)pg·mg-1]고우0 h[(10.38±3.18)pg·mg-1],차이유통계학의의(P =0.005)；1 h린산화p65함량[(23.31 ±2.05)pg· mg-1]고우0.5h,차이유통계학의의(P =0.020)；3 h린산화p65함량[(31.80±1.84)pg·mg-1]고우1 h,차이유통계학의의(P =0.002)；6 h린산화p65함량[(18.42±3.61)pg·mg-1]저우3 h(P =0.000),단고우0 h(P=0.003) 결론:인공관절가체마손과립가통과NF-κB신호통로상조거서세포유주억제인자적표체,촉진가체주위염증반응,도치가체주위골흡수、용해,도치가체무균성송동.