中国药理学与毒理学杂志
中國藥理學與毒理學雜誌
중국약이학여독이학잡지
CHINESE JOURNAL OF PHARMACOLOGY AND TOXICOLOGY
2013年
1期
77-83
,共7页
魏寅祥%赵青%任志广%贾砚寒%李新颖%黎燕%彭晖%马远方
魏寅祥%趙青%任誌廣%賈硯寒%李新穎%黎燕%彭暉%馬遠方
위인상%조청%임지엄%가연한%리신영%려연%팽휘%마원방
米哚妥林%多药耐药相关蛋白%糖蛋白类%蛋白激酶抑制剂
米哚妥林%多藥耐藥相關蛋白%糖蛋白類%蛋白激酶抑製劑
미타타림%다약내약상관단백%당단백류%단백격매억제제
目的 评价新型激酶抑制剂类抗癌药米哚妥林逆转P糖蛋白(P-gp)介导肿瘤细胞多药耐药的作用,并探讨其可能机制.方法 米哚妥林0.5,1和5 μmol·L-1分别加入P-gp高表达的K562/A02和K562细胞中培养72 h,MTS法测定细胞存活率以检测细胞毒性.米哚妥林0.125,0.25和0.5 μmol· L-1在K562/A02和K562细胞中与无毒剂量的P-gp底物多柔比星、紫杉醇或长春新碱共培养72 h,MTS法测定细胞存活率以检测逆转耐药作用.米哚妥林0.5和10 μmol· L-1与P-gp荧光底物罗丹明123在耐药和敏感细胞中共同孵育30 min后用流式细胞术分析底物积累的变化.米哚妥林0.5 μmol·L-1与耐药和敏感细胞共同孵育72 h,Western印迹法检测耐药蛋白和信号分子的表达,定量PCR检测MDR1基因表达的变化.将米哚妥林与P-gp膜蛋白共孵育,化学发光法测定剩余ATP的量,检测米哚妥林对P-gp ATP酶活性的影响.结果 米哚妥林对P-gp高表达的K562/A02和亲本敏感细胞K562的细胞毒性无明显的差异,其中米哚妥林0.5 μmol· L-1时2种细胞的存活率均达80％以上.米哚妥林0.5 μmol·L-1在细胞水平即可有效逆转K562/A02对多种底物的耐药,而对敏感细胞无显著作用;米哚妥林能显著抑制P-gp的外排作用,增加底物Rh-123在K562/A02细胞中的积累,且效果好于阴性对照维拉帕米0.5和10 μmol·L-1;米哚妥林对P-gp基因和蛋白表达以及AKT和ERK的表达与磷酸化水平均无影响;米哚妥林对P-gp的ATP酶活性具有明显的抑制作用.结论 米哚妥林可抑制P-gp介导的药物外排并逆转P-gp介导的肿瘤多药耐药.
目的 評價新型激酶抑製劑類抗癌藥米哚妥林逆轉P糖蛋白(P-gp)介導腫瘤細胞多藥耐藥的作用,併探討其可能機製.方法 米哚妥林0.5,1和5 μmol·L-1分彆加入P-gp高錶達的K562/A02和K562細胞中培養72 h,MTS法測定細胞存活率以檢測細胞毒性.米哚妥林0.125,0.25和0.5 μmol· L-1在K562/A02和K562細胞中與無毒劑量的P-gp底物多柔比星、紫杉醇或長春新堿共培養72 h,MTS法測定細胞存活率以檢測逆轉耐藥作用.米哚妥林0.5和10 μmol· L-1與P-gp熒光底物囉丹明123在耐藥和敏感細胞中共同孵育30 min後用流式細胞術分析底物積纍的變化.米哚妥林0.5 μmol·L-1與耐藥和敏感細胞共同孵育72 h,Western印跡法檢測耐藥蛋白和信號分子的錶達,定量PCR檢測MDR1基因錶達的變化.將米哚妥林與P-gp膜蛋白共孵育,化學髮光法測定剩餘ATP的量,檢測米哚妥林對P-gp ATP酶活性的影響.結果 米哚妥林對P-gp高錶達的K562/A02和親本敏感細胞K562的細胞毒性無明顯的差異,其中米哚妥林0.5 μmol· L-1時2種細胞的存活率均達80％以上.米哚妥林0.5 μmol·L-1在細胞水平即可有效逆轉K562/A02對多種底物的耐藥,而對敏感細胞無顯著作用;米哚妥林能顯著抑製P-gp的外排作用,增加底物Rh-123在K562/A02細胞中的積纍,且效果好于陰性對照維拉帕米0.5和10 μmol·L-1;米哚妥林對P-gp基因和蛋白錶達以及AKT和ERK的錶達與燐痠化水平均無影響;米哚妥林對P-gp的ATP酶活性具有明顯的抑製作用.結論 米哚妥林可抑製P-gp介導的藥物外排併逆轉P-gp介導的腫瘤多藥耐藥.
목적 평개신형격매억제제류항암약미타타림역전P당단백(P-gp)개도종류세포다약내약적작용,병탐토기가능궤제.방법 미타타림0.5,1화5 μmol·L-1분별가입P-gp고표체적K562/A02화K562세포중배양72 h,MTS법측정세포존활솔이검측세포독성.미타타림0.125,0.25화0.5 μmol· L-1재K562/A02화K562세포중여무독제량적P-gp저물다유비성、자삼순혹장춘신감공배양72 h,MTS법측정세포존활솔이검측역전내약작용.미타타림0.5화10 μmol· L-1여P-gp형광저물라단명123재내약화민감세포중공동부육30 min후용류식세포술분석저물적루적변화.미타타림0.5 μmol·L-1여내약화민감세포공동부육72 h,Western인적법검측내약단백화신호분자적표체,정량PCR검측MDR1기인표체적변화.장미타타림여P-gp막단백공부육,화학발광법측정잉여ATP적량,검측미타타림대P-gp ATP매활성적영향.결과 미타타림대P-gp고표체적K562/A02화친본민감세포K562적세포독성무명현적차이,기중미타타림0.5 μmol· L-1시2충세포적존활솔균체80％이상.미타타림0.5 μmol·L-1재세포수평즉가유효역전K562/A02대다충저물적내약,이대민감세포무현저작용;미타타림능현저억제P-gp적외배작용,증가저물Rh-123재K562/A02세포중적적루,차효과호우음성대조유랍파미0.5화10 μmol·L-1;미타타림대P-gp기인화단백표체이급AKT화ERK적표체여린산화수평균무영향;미타타림대P-gp적ATP매활성구유명현적억제작용.결론 미타타림가억제P-gp개도적약물외배병역전P-gp개도적종류다약내약.
