中国药理学与毒理学杂志
中國藥理學與毒理學雜誌
중국약이학여독이학잡지
CHINESE JOURNAL OF PHARMACOLOGY AND TOXICOLOGY
2013年
1期
48-53
,共6页
李金优%宋顺德%毛连根%曾豆豆%史建蓉%陈季强%李子刚%汤慧芳
李金優%宋順德%毛連根%曾豆豆%史建蓉%陳季彊%李子剛%湯慧芳
리금우%송순덕%모련근%증두두%사건용%진계강%리자강%탕혜방
磷酸二酯酶4B%肺纤维化%博来霉素
燐痠二酯酶4B%肺纖維化%博來黴素
린산이지매4B%폐섬유화%박래매소
目的 观察博来霉素诱导的小鼠肺纤维化过程中磷酸二酯酶4B(PDE4B) mRNA和蛋白表达随时间的变化,初步探究PDE4B在小鼠肺纤维化过程中的作用.方法 采用气道滴入博来霉素2.5 mg·kg-1制备肺纤维化模型,在造模后第3,7,14,21和28天进行支气管肺泡灌洗并留取肺组织.应用细胞形态学方法计数支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞总数和分类;ELISA法测定BALF中巨噬细胞炎症蛋白2(MIP2)、白细胞介素6(IL-6)、IL-13和转化生长因子β1(TGF-31)含量;胶原试剂盒测定法测定肺组织胶原含量;髓过氧化物酶(MPO)活性测定试剂盒测定组织匀浆液中MPO活性;实时荧光定量PCR方法检测小鼠肺组织中PDE4B mRNA表达;免疫组织化学法检测PDE4B的分布.结果 博来霉素气道滴入诱导的肺纤维化随时间持续加重,第28天最明显,可见肺组织明显实质化.BALF中白细胞总数、IL-1β和IL-6在造模后第3天达峰值,分别为正常对照组的22.0,2.0和2.8倍;MPO和TGF-31在第7天达峰值,分别为正常对照组的1.9和5.5倍;胶原含量、MIP-2和PDE4B mRNA表达从造模后呈持续增长趋势,分别为正常对照组的1.6,2.7和2.6倍.免疫组织化学法检测结果表明,PDE4B分布于炎症细胞和纤维化的肺组织.结论 PDE4B在肺纤维化中发挥重要作用,可能是一个特异性的药物作用靶点.
目的 觀察博來黴素誘導的小鼠肺纖維化過程中燐痠二酯酶4B(PDE4B) mRNA和蛋白錶達隨時間的變化,初步探究PDE4B在小鼠肺纖維化過程中的作用.方法 採用氣道滴入博來黴素2.5 mg·kg-1製備肺纖維化模型,在造模後第3,7,14,21和28天進行支氣管肺泡灌洗併留取肺組織.應用細胞形態學方法計數支氣管肺泡灌洗液(BALF)中白細胞總數和分類;ELISA法測定BALF中巨噬細胞炎癥蛋白2(MIP2)、白細胞介素6(IL-6)、IL-13和轉化生長因子β1(TGF-31)含量;膠原試劑盒測定法測定肺組織膠原含量;髓過氧化物酶(MPO)活性測定試劑盒測定組織勻漿液中MPO活性;實時熒光定量PCR方法檢測小鼠肺組織中PDE4B mRNA錶達;免疫組織化學法檢測PDE4B的分佈.結果 博來黴素氣道滴入誘導的肺纖維化隨時間持續加重,第28天最明顯,可見肺組織明顯實質化.BALF中白細胞總數、IL-1β和IL-6在造模後第3天達峰值,分彆為正常對照組的22.0,2.0和2.8倍;MPO和TGF-31在第7天達峰值,分彆為正常對照組的1.9和5.5倍;膠原含量、MIP-2和PDE4B mRNA錶達從造模後呈持續增長趨勢,分彆為正常對照組的1.6,2.7和2.6倍.免疫組織化學法檢測結果錶明,PDE4B分佈于炎癥細胞和纖維化的肺組織.結論 PDE4B在肺纖維化中髮揮重要作用,可能是一箇特異性的藥物作用靶點.
목적 관찰박래매소유도적소서폐섬유화과정중린산이지매4B(PDE4B) mRNA화단백표체수시간적변화,초보탐구PDE4B재소서폐섬유화과정중적작용.방법 채용기도적입박래매소2.5 mg·kg-1제비폐섬유화모형,재조모후제3,7,14,21화28천진행지기관폐포관세병류취폐조직.응용세포형태학방법계수지기관폐포관세액(BALF)중백세포총수화분류;ELISA법측정BALF중거서세포염증단백2(MIP2)、백세포개소6(IL-6)、IL-13화전화생장인자β1(TGF-31)함량;효원시제합측정법측정폐조직효원함량;수과양화물매(MPO)활성측정시제합측정조직균장액중MPO활성;실시형광정량PCR방법검측소서폐조직중PDE4B mRNA표체;면역조직화학법검측PDE4B적분포.결과 박래매소기도적입유도적폐섬유화수시간지속가중,제28천최명현,가견폐조직명현실질화.BALF중백세포총수、IL-1β화IL-6재조모후제3천체봉치,분별위정상대조조적22.0,2.0화2.8배;MPO화TGF-31재제7천체봉치,분별위정상대조조적1.9화5.5배;효원함량、MIP-2화PDE4B mRNA표체종조모후정지속증장추세,분별위정상대조조적1.6,2.7화2.6배.면역조직화학법검측결과표명,PDE4B분포우염증세포화섬유화적폐조직.결론 PDE4B재폐섬유화중발휘중요작용,가능시일개특이성적약물작용파점.
