广西师范大学学报（自然科学版）
廣西師範大學學報（自然科學版）
엄서사범대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF GUANGXI NORMAL UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE EDITION)
2014年
1期
123-126
,共4页
曾淑兰%安运锋%卢超%张立杰%张国海
曾淑蘭%安運鋒%盧超%張立傑%張國海
증숙란%안운봉%로초%장립걸%장국해
肝星状细胞%细胞分离%原代培养%鉴定
肝星狀細胞%細胞分離%原代培養%鑒定
간성상세포%세포분리%원대배양%감정
hepatic stellate cells%cell isolation%primary culture%identification
本文通过二步原位灌注的方法分离得到大鼠肝脏,随后通过机械剪切,用0.2 g/L链霉蛋白酶E,0.2g/L胶原酶Ⅳ以及0.1 g/L DNase Ⅰ消化和分散,筛网过滤、经130 g/L Nycodenz密度梯度离心后收集肝星状细胞,经台盼蓝染色后用细胞计数仪鉴定细胞存活率,α-SMA(平滑肌动蛋白)免疫细胞化学染色法鉴定肝星状细胞纯度.结果显示,肝星状细胞的得率为每个肝脏3.5×107个细胞以上,肝星状细胞纯度为95％左右,肝星状细胞存活率为(97.0±3.2)％,满足实验需要.
本文通過二步原位灌註的方法分離得到大鼠肝髒,隨後通過機械剪切,用0.2 g/L鏈黴蛋白酶E,0.2g/L膠原酶Ⅳ以及0.1 g/L DNase Ⅰ消化和分散,篩網過濾、經130 g/L Nycodenz密度梯度離心後收集肝星狀細胞,經檯盼藍染色後用細胞計數儀鑒定細胞存活率,α-SMA(平滑肌動蛋白)免疫細胞化學染色法鑒定肝星狀細胞純度.結果顯示,肝星狀細胞的得率為每箇肝髒3.5×107箇細胞以上,肝星狀細胞純度為95％左右,肝星狀細胞存活率為(97.0±3.2)％,滿足實驗需要.
본문통과이보원위관주적방법분리득도대서간장,수후통과궤계전절,용0.2 g/L련매단백매E,0.2g/L효원매Ⅳ이급0.1 g/L DNase Ⅰ소화화분산,사망과려、경130 g/L Nycodenz밀도제도리심후수집간성상세포,경태반람염색후용세포계수의감정세포존활솔,α-SMA(평활기동단백)면역세포화학염색법감정간성상세포순도.결과현시,간성상세포적득솔위매개간장3.5×107개세포이상,간성상세포순도위95％좌우,간성상세포존활솔위(97.0±3.2)％,만족실험수요.
