西安交通大学学报（医学版）
西安交通大學學報（醫學版）
서안교통대학학보（의학판）
JOURNAL OF XI'AN JIAOTONG UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCES)
2014年
4期
557-561,564
,共6页
程妍%张军%张蓉%刘冬%陈晓黎%谢丹红%龚均
程妍%張軍%張蓉%劉鼕%陳曉黎%謝丹紅%龔均
정연%장군%장용%류동%진효려%사단홍%공균
贲门腺癌%激光捕获显微切割%蛋白质组%双向凝胶电泳
賁門腺癌%激光捕穫顯微切割%蛋白質組%雙嚮凝膠電泳
분문선암%격광포획현미절할%단백질조%쌍향응효전영
gastric cardia adenocarcinoma%laser capture microdissection%proteomics%two-dimensional gel electrophoresis(2-DE)
目的 建立一套适用于贲门腺癌差异蛋白质组学研究的导向激光捕获显微切割技术(navigated laser capture microdissection,NLCM)方法,并探讨其可行性.方法 比较染色剂和固定剂对蛋白质影响的差异,探讨不同处理条件下贲门腺癌和癌旁组织切片的镜下组织学特点,改进常规LCM,建立在染色切片指引下分离细胞的NLCM技术,并通过双向凝胶电泳分析对该技术进行评价.结果 染色剂对蛋白质的影响大于700 mL/L乙醇固定剂;光镜下在不染色的组织切片上,贲门腺癌细胞、肠化生细胞和正常柱状上皮细胞都有其各自的形态特异性,易于辨认;NLCM可以准确纯化贲门腺癌细胞、肠化生细胞和正常柱状细胞;LCM的苏木素染色贲门腺癌细胞(A组)、NLCM的无染色贲门腺癌细胞(B组)和未切割的新鲜贲门腺癌组织(C组)的双向电泳表达图谱非常相似.各组蛋白质点的数量之间差异无统计学意义(P＞0.05).A组碱性端蛋白等点聚焦较差,部分蛋白质点的表达量减低或消失,B组双向电泳表达图谱蛋白质点分离较好.结论 NLCM不但可以快速、准确地将贲门腺癌及其癌前病变细胞进行分离,而且有效避免了染色剂对蛋白质提取质量的影响,是一项适用于贲门腺癌蛋白质组学研究的样品制备方法.
目的 建立一套適用于賁門腺癌差異蛋白質組學研究的導嚮激光捕穫顯微切割技術(navigated laser capture microdissection,NLCM)方法,併探討其可行性.方法 比較染色劑和固定劑對蛋白質影響的差異,探討不同處理條件下賁門腺癌和癌徬組織切片的鏡下組織學特點,改進常規LCM,建立在染色切片指引下分離細胞的NLCM技術,併通過雙嚮凝膠電泳分析對該技術進行評價.結果 染色劑對蛋白質的影響大于700 mL/L乙醇固定劑;光鏡下在不染色的組織切片上,賁門腺癌細胞、腸化生細胞和正常柱狀上皮細胞都有其各自的形態特異性,易于辨認;NLCM可以準確純化賁門腺癌細胞、腸化生細胞和正常柱狀細胞;LCM的囌木素染色賁門腺癌細胞(A組)、NLCM的無染色賁門腺癌細胞(B組)和未切割的新鮮賁門腺癌組織(C組)的雙嚮電泳錶達圖譜非常相似.各組蛋白質點的數量之間差異無統計學意義(P＞0.05).A組堿性耑蛋白等點聚焦較差,部分蛋白質點的錶達量減低或消失,B組雙嚮電泳錶達圖譜蛋白質點分離較好.結論 NLCM不但可以快速、準確地將賁門腺癌及其癌前病變細胞進行分離,而且有效避免瞭染色劑對蛋白質提取質量的影響,是一項適用于賁門腺癌蛋白質組學研究的樣品製備方法.
목적 건립일투괄용우분문선암차이단백질조학연구적도향격광포획현미절할기술(navigated laser capture microdissection,NLCM)방법,병탐토기가행성.방법 비교염색제화고정제대단백질영향적차이,탐토불동처리조건하분문선암화암방조직절편적경하조직학특점,개진상규LCM,건립재염색절편지인하분리세포적NLCM기술,병통과쌍향응효전영분석대해기술진행평개.결과 염색제대단백질적영향대우700 mL/L을순고정제;광경하재불염색적조직절편상,분문선암세포、장화생세포화정상주상상피세포도유기각자적형태특이성,역우변인;NLCM가이준학순화분문선암세포、장화생세포화정상주상세포;LCM적소목소염색분문선암세포(A조)、NLCM적무염색분문선암세포(B조)화미절할적신선분문선암조직(C조)적쌍향전영표체도보비상상사.각조단백질점적수량지간차이무통계학의의(P＞0.05).A조감성단단백등점취초교차,부분단백질점적표체량감저혹소실,B조쌍향전영표체도보단백질점분리교호.결론 NLCM불단가이쾌속、준학지장분문선암급기암전병변세포진행분리,이차유효피면료염색제대단백질제취질량적영향,시일항괄용우분문선암단백질조학연구적양품제비방법.
