中国预防兽医学报
中國預防獸醫學報
중국예방수의학보
CHINESE JOURNAL OF PREVENTIVE VETERINARY MEDICINE
2013年
3期
242-244
,共3页
戈曼%吴星亮%尹鑫%魏萍%王晓钧
戈曼%吳星亮%尹鑫%魏萍%王曉鈞
과만%오성량%윤흠%위평%왕효균
SAMHD1%单克隆抗体%ELISA%免疫荧光%免疫印迹
SAMHD1%單剋隆抗體%ELISA%免疫熒光%免疫印跡
SAMHD1%단극륭항체%ELISA%면역형광%면역인적
SAMHD1是最近发现的在人髓系细胞中发挥抗艾滋病毒作用的一种天然蛋白.为制备抗人huSAMHD1蛋白的单克隆抗体(MAb),本研究利用原核表达并纯化的人huSAMHD1重组蛋白为免疫原,经腹腔免疫4周龄BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,经间接ELISA法筛选和4次有限稀释法克隆纯化,获得了1株稳定分泌MAb的杂交瘤细胞株.Western blot与间接免疫荧光试验结果表明,获得的MAb与人huSAMHD1的真核表达蛋白呈阳性反应,而与猴、马SAMHD1的真核表达蛋白呈阴性反应,表明其具有很好的特异性,可以用于ELISA、免疫荧光和免疫印迹检测以及对huSAMHD1的进一步研究.
SAMHD1是最近髮現的在人髓繫細胞中髮揮抗艾滋病毒作用的一種天然蛋白.為製備抗人huSAMHD1蛋白的單剋隆抗體(MAb),本研究利用原覈錶達併純化的人huSAMHD1重組蛋白為免疫原,經腹腔免疫4週齡BALB/c小鼠,取其脾細胞與SP2/0骨髓瘤細胞進行融閤,經間接ELISA法篩選和4次有限稀釋法剋隆純化,穫得瞭1株穩定分泌MAb的雜交瘤細胞株.Western blot與間接免疫熒光試驗結果錶明,穫得的MAb與人huSAMHD1的真覈錶達蛋白呈暘性反應,而與猴、馬SAMHD1的真覈錶達蛋白呈陰性反應,錶明其具有很好的特異性,可以用于ELISA、免疫熒光和免疫印跡檢測以及對huSAMHD1的進一步研究.
SAMHD1시최근발현적재인수계세포중발휘항애자병독작용적일충천연단백.위제비항인huSAMHD1단백적단극륭항체(MAb),본연구이용원핵표체병순화적인huSAMHD1중조단백위면역원,경복강면역4주령BALB/c소서,취기비세포여SP2/0골수류세포진행융합,경간접ELISA법사선화4차유한희석법극륭순화,획득료1주은정분비MAb적잡교류세포주.Western blot여간접면역형광시험결과표명,획득적MAb여인huSAMHD1적진핵표체단백정양성반응,이여후、마SAMHD1적진핵표체단백정음성반응,표명기구유흔호적특이성,가이용우ELISA、면역형광화면역인적검측이급대huSAMHD1적진일보연구.
