中国预防兽医学报
中國預防獸醫學報
중국예방수의학보
CHINESE JOURNAL OF PREVENTIVE VETERINARY MEDICINE
2013年
3期
222-226
,共5页
孙彦欣%左玉柱%李建辉%范京惠%裴丽华%杨震%王晨枫
孫彥訢%左玉柱%李建輝%範京惠%裴麗華%楊震%王晨楓
손언흔%좌옥주%리건휘%범경혜%배려화%양진%왕신풍
猪细小病毒VP2基因%猪圆环病毒P21表位序列%核酸疫苗
豬細小病毒VP2基因%豬圓環病毒P21錶位序列%覈痠疫苗
저세소병독VP2기인%저원배병독P21표위서렬%핵산역묘
为研制猪细小病毒(PPV)主要保护性抗原VP2基因核酸疫苗,本研究将猪圆环病毒(PCV)编码T细胞表位P21多肽的序列连接于PPV VP2基因的5’端克隆于pcDNA3.1(+)中,构建重组表达质粒pcDNA-P21-VP2,并将其经磷酸钙介导转染HEK293T细胞中检测其表达情况.SDS-PAGE和western blot检测表明,P21-VP2重组蛋白获得了有效的表达,其分子量约为67 ku.将pcDNA-P21-VP2肌肉注射BALB/c小鼠后,采用ELISA方法检测其抗体,并采用MTT法检测小鼠免疫后脾脏淋巴细胞的增殖活性.试验结果表明,重组质粒能够有效诱导小鼠产生明显的抗体反应,并且对淋巴细胞的增殖反应有明显促进作用.该实验结果为研制有效的PPV核酸疫苗奠定了基础.
為研製豬細小病毒(PPV)主要保護性抗原VP2基因覈痠疫苗,本研究將豬圓環病毒(PCV)編碼T細胞錶位P21多肽的序列連接于PPV VP2基因的5’耑剋隆于pcDNA3.1(+)中,構建重組錶達質粒pcDNA-P21-VP2,併將其經燐痠鈣介導轉染HEK293T細胞中檢測其錶達情況.SDS-PAGE和western blot檢測錶明,P21-VP2重組蛋白穫得瞭有效的錶達,其分子量約為67 ku.將pcDNA-P21-VP2肌肉註射BALB/c小鼠後,採用ELISA方法檢測其抗體,併採用MTT法檢測小鼠免疫後脾髒淋巴細胞的增殖活性.試驗結果錶明,重組質粒能夠有效誘導小鼠產生明顯的抗體反應,併且對淋巴細胞的增殖反應有明顯促進作用.該實驗結果為研製有效的PPV覈痠疫苗奠定瞭基礎.
위연제저세소병독(PPV)주요보호성항원VP2기인핵산역묘,본연구장저원배병독(PCV)편마T세포표위P21다태적서렬련접우PPV VP2기인적5’단극륭우pcDNA3.1(+)중,구건중조표체질립pcDNA-P21-VP2,병장기경린산개개도전염HEK293T세포중검측기표체정황.SDS-PAGE화western blot검측표명,P21-VP2중조단백획득료유효적표체,기분자량약위67 ku.장pcDNA-P21-VP2기육주사BALB/c소서후,채용ELISA방법검측기항체,병채용MTT법검측소서면역후비장림파세포적증식활성.시험결과표명,중조질립능구유효유도소서산생명현적항체반응,병차대림파세포적증식반응유명현촉진작용.해실험결과위연제유효적PPV핵산역묘전정료기출.
