猪流行性腹泻病毒N蛋白核仁定位信号对宿主细胞周期的影响
저류행성복사병독N단백핵인정위신호대숙주세포주기적영향
Effects on host cell cycle by nucleoli localization signal peptides of porcine epidemic diarrhea virus nucleocapsid protein
  • 万方数据
    中国预防兽医学报 중국예방수의학보
    CHINESE JOURNAL OF PREVENTIVE VETERINARY MEDICINE
    2013年 3期 173-176 ,共4页

    刘随新%石达%陈建飞%张鑫%时洪艳%刘孝珍%张莎%王璐%冯力

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    저류행성복사병독%핵의각단백%핵인정위신호%류식세포술%숙주세포주기
    为研究猪流行性腹泻病毒(PEDV)核衣壳蛋白(N)与宿主细胞相互作用,本研究根据前期已经鉴定的PEDVN蛋白核仁定位信号序列,利用重叠延伸PCR (SOE-PCR)方法扩增出核仁定位信号序列缺失的PEDVN基因(dN),并将其与真核表达载体pAc-GFP-Cl连接,构建重组质粒pAc-GFP-dN.将pAc-GFP-dN转染于Vero E6细胞中,利用激光共聚焦显微镜分析重组质粒pAc-GFP-dN表达蛋白的定位情况,并利用流式细胞仪检测转染细胞的周期变化.实验结果表明:与完整的N蛋白相比,缺失核仁定位信号的N蛋白不能定位于细胞核仁,同时丧失了使宿主细胞周期在G2/M期停滞的能力,从而揭示了N蛋白核仁定位信号对宿主细胞具有重要的影响.
    위연구저류행성복사병독(PEDV)핵의각단백(N)여숙주세포상호작용,본연구근거전기이경감정적PEDVN단백핵인정위신호서렬,이용중첩연신PCR (SOE-PCR)방법확증출핵인정위신호서렬결실적PEDVN기인(dN),병장기여진핵표체재체pAc-GFP-Cl련접,구건중조질립pAc-GFP-dN.장pAc-GFP-dN전염우Vero E6세포중,이용격광공취초현미경분석중조질립pAc-GFP-dN표체단백적정위정황,병이용류식세포의검측전염세포적주기변화.실험결과표명:여완정적N단백상비,결실핵인정위신호적N단백불능정위우세포핵인,동시상실료사숙주세포주기재G2/M기정체적능력,종이게시료N단백핵인정위신호대숙주세포구유중요적영향.
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