中国组织工程研究
中國組織工程研究
중국조직공정연구
Journal of Clinical Rehabilitative Tissue Engineering Research
2012年
18期
3341-3344
,共4页
乔玉莉%张鹏%苏家光%陈志坚%周素芳%廖志红%林文珍
喬玉莉%張鵬%囌傢光%陳誌堅%週素芳%廖誌紅%林文珍
교옥리%장붕%소가광%진지견%주소방%료지홍%림문진
抗原血清学识别的重组表达克隆技术%抗原%cDNA文库%噬菌体
抗原血清學識彆的重組錶達剋隆技術%抗原%cDNA文庫%噬菌體
항원혈청학식별적중조표체극륭기술%항원%cDNA문고%서균체
背景:抗原血清学识别重组表达克隆技术的应用有许多报道,但存在假阳性较高、稳定性欠佳等诸多问题.目的:优化抗原血清学识别重组表达克隆技术,建立灵敏且稳定的技术体系.方法:利用抗原血清学识别重组表达克隆技术,比较血清的处理方法、异丙基-β-D硫代半乳糖苷的加入方式、不同的封闭条件及培养基厚度对显色结果的影响,观察噬菌斑显色深浅、背景处理及假阳性的产生.结果与结论:直接法预处理血清、异丙基-β-D硫代半乳糖苷浸泡硝酸纤维素膜并干燥结合脱脂奶粉进行封闭,显色效果最佳.此外选择适当的培养基厚度可有效消除边缘效应.提示血清预处理、异丙基-β-D硫代半乳糖苷的加入方式、不同封闭条件及培养基厚度等因素,在利用抗原血清学识别的重组表达克隆技术进行抗原筛选中起关键作用.
揹景:抗原血清學識彆重組錶達剋隆技術的應用有許多報道,但存在假暘性較高、穩定性欠佳等諸多問題.目的:優化抗原血清學識彆重組錶達剋隆技術,建立靈敏且穩定的技術體繫.方法:利用抗原血清學識彆重組錶達剋隆技術,比較血清的處理方法、異丙基-β-D硫代半乳糖苷的加入方式、不同的封閉條件及培養基厚度對顯色結果的影響,觀察噬菌斑顯色深淺、揹景處理及假暘性的產生.結果與結論:直接法預處理血清、異丙基-β-D硫代半乳糖苷浸泡硝痠纖維素膜併榦燥結閤脫脂奶粉進行封閉,顯色效果最佳.此外選擇適噹的培養基厚度可有效消除邊緣效應.提示血清預處理、異丙基-β-D硫代半乳糖苷的加入方式、不同封閉條件及培養基厚度等因素,在利用抗原血清學識彆的重組錶達剋隆技術進行抗原篩選中起關鍵作用.
배경:항원혈청학식별중조표체극륭기술적응용유허다보도,단존재가양성교고、은정성흠가등제다문제.목적:우화항원혈청학식별중조표체극륭기술,건립령민차은정적기술체계.방법:이용항원혈청학식별중조표체극륭기술,비교혈청적처리방법、이병기-β-D류대반유당감적가입방식、불동적봉폐조건급배양기후도대현색결과적영향,관찰서균반현색심천、배경처리급가양성적산생.결과여결론:직접법예처리혈청、이병기-β-D류대반유당감침포초산섬유소막병간조결합탈지내분진행봉폐,현색효과최가.차외선택괄당적배양기후도가유효소제변연효응.제시혈청예처리、이병기-β-D류대반유당감적가입방식、불동봉폐조건급배양기후도등인소,재이용항원혈청학식별적중조표체극륭기술진행항원사선중기관건작용.
