中国动物传染病学报
中國動物傳染病學報
중국동물전염병학보
CHINESE JOURNAL OF VETERINARY PARASITOLOGY
2012年
2期
42-46
,共5页
姬希文%李雪松%边延峰%李国新%颜丕熙%张七斤%李泽君
姬希文%李雪鬆%邊延峰%李國新%顏丕熙%張七斤%李澤君
희희문%리설송%변연봉%리국신%안비희%장칠근%리택군
鸭坦布苏病毒%E基因%克隆%表达
鴨坦佈囌病毒%E基因%剋隆%錶達
압탄포소병독%E기인%극륭%표체
Duck Tembusu virus%E gene%cloning%expression
本研究利用RT-PCR方法扩增鸭坦布苏病毒（Duck tembusu virus,DTMUV）奉贤株（FX2010）的结构蛋白E基因,并将其克隆至原核表达载体pET32a（＋）,构建重组表达质粒pET32a-E。将其转化受体菌E.coli BL21（DE3）感受态细胞,经IPTG诱导进行表达。SDS-PAGE和Western blot试验检测结果表明,E基因在大肠杆菌中得到了表达,并且可与抗DTMUV的多克隆抗体发生特异性反应。E基因的成功表达为DTMUV的诊断试剂盒、疫苗等的研制奠定基础。
本研究利用RT-PCR方法擴增鴨坦佈囌病毒（Duck tembusu virus,DTMUV）奉賢株（FX2010）的結構蛋白E基因,併將其剋隆至原覈錶達載體pET32a（＋）,構建重組錶達質粒pET32a-E。將其轉化受體菌E.coli BL21（DE3）感受態細胞,經IPTG誘導進行錶達。SDS-PAGE和Western blot試驗檢測結果錶明,E基因在大腸桿菌中得到瞭錶達,併且可與抗DTMUV的多剋隆抗體髮生特異性反應。E基因的成功錶達為DTMUV的診斷試劑盒、疫苗等的研製奠定基礎。
본연구이용RT-PCR방법확증압탄포소병독（Duck tembusu virus,DTMUV）봉현주（FX2010）적결구단백E기인,병장기극륭지원핵표체재체pET32a（＋）,구건중조표체질립pET32a-E。장기전화수체균E.coli BL21（DE3）감수태세포,경IPTG유도진행표체。SDS-PAGE화Western blot시험검측결과표명,E기인재대장간균중득도료표체,병차가여항DTMUV적다극륭항체발생특이성반응。E기인적성공표체위DTMUV적진단시제합、역묘등적연제전정기출。
The E gene of duck Tembusu virus（DTMUV） was amplified in RT-PCR and inserted into the multiple clone sites of the pET32a（＋） vector.The recombinant plasmid was transformed into BL21（DE3） competent cells,and expression of the E protein was induced with IPTG.The E protein was expressed in BL21（DE3） cells and visualized to react with specific DTMUV antibody in SDS-PAGE and Western blot.
