浙江林业科技
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절강임업과기
JOURNAL OF ZHEJIANG FORESTRY SCIENCE AND TECHNOLOGY
2014年
3期
26-30
,共5页
吕昕谣%赵颖%赵国淼%曾燕如%宋绪忠%杨华
呂昕謠%趙穎%趙國淼%曾燕如%宋緒忠%楊華
려흔요%조영%조국묘%증연여%송서충%양화
普陀樟%SRAP%体系建立%引物筛选
普陀樟%SRAP%體繫建立%引物篩選
보타장%SRAP%체계건립%인물사선
Cinnamomum japonicum var. chenii%SRAP%system optimization%screening primers
以舟山群岛的普陀樟（Cinnamomum japonicum var.chenii）新鲜叶片为实验材料，采用L16（45）正交试验设计，对影响普陀樟SRAP-PCR反应的Mg2+浓度、dNTPS、Taq DNA聚合酶、引物和模板DNA用量5因素组合进行了筛选。结果表明：适于普陀樟的SRAP-PCR反应体系（20μL）为2.5 mmol/L Mg2+、0.2 mmol/L dNTPs、1.5 U Taq DNA聚合酶、0.4μmol/L引物、10 ng模板DNA、2μL 10×PCR buffer，该体系位点清晰，扩增稳定；利用该反应体系从100对SRAP引物组合中筛选出多态性好的引物24对。
以舟山群島的普陀樟（Cinnamomum japonicum var.chenii）新鮮葉片為實驗材料，採用L16（45）正交試驗設計，對影響普陀樟SRAP-PCR反應的Mg2+濃度、dNTPS、Taq DNA聚閤酶、引物和模闆DNA用量5因素組閤進行瞭篩選。結果錶明：適于普陀樟的SRAP-PCR反應體繫（20μL）為2.5 mmol/L Mg2+、0.2 mmol/L dNTPs、1.5 U Taq DNA聚閤酶、0.4μmol/L引物、10 ng模闆DNA、2μL 10×PCR buffer，該體繫位點清晰，擴增穩定；利用該反應體繫從100對SRAP引物組閤中篩選齣多態性好的引物24對。
이주산군도적보타장（Cinnamomum japonicum var.chenii）신선협편위실험재료，채용L16（45）정교시험설계，대영향보타장SRAP-PCR반응적Mg2+농도、dNTPS、Taq DNA취합매、인물화모판DNA용량5인소조합진행료사선。결과표명：괄우보타장적SRAP-PCR반응체계（20μL）위2.5 mmol/L Mg2+、0.2 mmol/L dNTPs、1.5 U Taq DNA취합매、0.4μmol/L인물、10 ng모판DNA、2μL 10×PCR buffer，해체계위점청석，확증은정；이용해반응체계종100대SRAP인물조합중사선출다태성호적인물24대。
With fresh leaves, orthogonal test of L16(45)was conducted on fresh leaves ofCinnamomum japonicum var.chenii to establish SRAP-PCR reaction system with five factors ( Mg2+, dNTPs, Taq DNA polymerase, primer and DNA template ). The result demonstrated that 20μL SRAP-PCR reaction system including 2.5 mmol/L Mg2+, 0.2 mmol/L dNTPs, 1.5 U Taq DNA polymerase, 0.4μmol/L primer, 10 ng template DNA and 2μL 10×PCR buffer was established, with advantages of clear loci and stable amplification. With the established system, 24 pairs of primers with polymorphic loci were screened from 100 pairs of SRAP primers.
