中国抗生素杂志
中國抗生素雜誌
중국항생소잡지
CHINESE JOURNAL OF ANTIBIOTICS
2013年
6期
455-460
,共6页
尚忠波%黄俊伟%刘敏%徐荣%韩冬青%楼永良%陈秀枢
尚忠波%黃俊偉%劉敏%徐榮%韓鼕青%樓永良%陳秀樞
상충파%황준위%류민%서영%한동청%루영량%진수추
多重耐药%大肠埃希菌%喹诺酮%qepA
多重耐藥%大腸埃希菌%喹諾酮%qepA
다중내약%대장애희균%규낙동%qepA
Multidrug resistance%Escherichia coli%Quinolones%qepA
目的 对临床分离的多重耐药大肠埃希菌(E.coli)喹诺酮外排泵基因qepA的携带率、接合传递、基因功能等进行研究.方法 临床分离的多重耐药E.coli 136株,经PCR筛选qepA基因,阳性菌株作16S rRNA甲基化酶基因rmtB的检测,PCR产物均经测序确认；阳性菌株进行质粒接合实验；扩增qepA基因全长,与pET-12a质粒连接,构建重组质粒,以研究qepA功能.结果 136株多重耐药E.coli qepA基因的检出率为14.0％(19/136),其中16株携带rmtB基因,二者的共存率高达84.2％(16/19).接合实验的耐药质粒传递率为63.2％(12/19),9株接合子中检出rmtB基因,占75.0％(9/12).与E.coli BL21(pET-12a)相比,诺氟沙星、环丙沙星和左氧氟沙星对E.coli BL21 (pET-12a-qepA)的MIC分别升高64倍、32倍和4倍；而与羰基氰氯苯腙(CCCP)联合应用时三种药物的MIC值则至少降低为原值的1/4.进一步检测菌体内环丙沙星含量,在不含CCCP时,E.coll BL21 (pET-12a-qepA)菌体中环丙沙星低于E.coli BL21 (pET-12a)或E.coli BL21(P＜0.01)；加入CCCP后,菌体内环丙沙星含量明显升高(P＜0.01).结论 本组多重耐药E.coli的qepA基因检出率较高(14.0％).qepA基因和rmtB基因具有较密切的相关性和共存率,且容易在菌际间传播.QepA为质子依赖的外排蛋白,可降低某些喹诺酮类药物在细菌体内的含量,使得对药物的敏感性下降.
目的 對臨床分離的多重耐藥大腸埃希菌(E.coli)喹諾酮外排泵基因qepA的攜帶率、接閤傳遞、基因功能等進行研究.方法 臨床分離的多重耐藥E.coli 136株,經PCR篩選qepA基因,暘性菌株作16S rRNA甲基化酶基因rmtB的檢測,PCR產物均經測序確認；暘性菌株進行質粒接閤實驗；擴增qepA基因全長,與pET-12a質粒連接,構建重組質粒,以研究qepA功能.結果 136株多重耐藥E.coli qepA基因的檢齣率為14.0％(19/136),其中16株攜帶rmtB基因,二者的共存率高達84.2％(16/19).接閤實驗的耐藥質粒傳遞率為63.2％(12/19),9株接閤子中檢齣rmtB基因,佔75.0％(9/12).與E.coli BL21(pET-12a)相比,諾氟沙星、環丙沙星和左氧氟沙星對E.coli BL21 (pET-12a-qepA)的MIC分彆升高64倍、32倍和4倍；而與羰基氰氯苯腙(CCCP)聯閤應用時三種藥物的MIC值則至少降低為原值的1/4.進一步檢測菌體內環丙沙星含量,在不含CCCP時,E.coll BL21 (pET-12a-qepA)菌體中環丙沙星低于E.coli BL21 (pET-12a)或E.coli BL21(P＜0.01)；加入CCCP後,菌體內環丙沙星含量明顯升高(P＜0.01).結論 本組多重耐藥E.coli的qepA基因檢齣率較高(14.0％).qepA基因和rmtB基因具有較密切的相關性和共存率,且容易在菌際間傳播.QepA為質子依賴的外排蛋白,可降低某些喹諾酮類藥物在細菌體內的含量,使得對藥物的敏感性下降.
목적 대림상분리적다중내약대장애희균(E.coli)규낙동외배빙기인qepA적휴대솔、접합전체、기인공능등진행연구.방법 림상분리적다중내약E.coli 136주,경PCR사선qepA기인,양성균주작16S rRNA갑기화매기인rmtB적검측,PCR산물균경측서학인；양성균주진행질립접합실험；확증qepA기인전장,여pET-12a질립련접,구건중조질립,이연구qepA공능.결과 136주다중내약E.coli qepA기인적검출솔위14.0％(19/136),기중16주휴대rmtB기인,이자적공존솔고체84.2％(16/19).접합실험적내약질립전체솔위63.2％(12/19),9주접합자중검출rmtB기인,점75.0％(9/12).여E.coli BL21(pET-12a)상비,낙불사성、배병사성화좌양불사성대E.coli BL21 (pET-12a-qepA)적MIC분별승고64배、32배화4배；이여탄기청록분종(CCCP)연합응용시삼충약물적MIC치칙지소강저위원치적1/4.진일보검측균체내배병사성함량,재불함CCCP시,E.coll BL21 (pET-12a-qepA)균체중배병사성저우E.coli BL21 (pET-12a)혹E.coli BL21(P＜0.01)；가입CCCP후,균체내배병사성함량명현승고(P＜0.01).결론 본조다중내약E.coli적qepA기인검출솔교고(14.0％).qepA기인화rmtB기인구유교밀절적상관성화공존솔,차용역재균제간전파.QepA위질자의뢰적외배단백,가강저모사규낙동류약물재세균체내적함량,사득대약물적민감성하강.
