中国预防兽医学报
中國預防獸醫學報
중국예방수의학보
CHINESE JOURNAL OF PREVENTIVE VETERINARY MEDICINE
2013年
4期
325-329
,共5页
罗洪林%王豪举%谌剑波%周雪梅%周容琼%周作勇
囉洪林%王豪舉%諶劍波%週雪梅%週容瓊%週作勇
라홍림%왕호거%심검파%주설매%주용경%주작용
犬恶丝虫%TPx%表达质粒%免疫原性
犬噁絲蟲%TPx%錶達質粒%免疫原性
견악사충%TPx%표체질립%면역원성
为评价犬恶丝虫硫氧还蛋白过氧化物酶(TPx)真核表达质粒的免疫原性,本实验利用RT-PCR方法扩增TPx基因,将其克隆于真核表达载体pVAX1中构建重组质粒pVAX1-TPx,并对其进行体外表达鉴定及通过特异性抗体水平及相关的免疫因子的检测,评价其在体内诱导的免疫反应.实验结果表明,将pVAX1-TPx转染于Cos7细胞中能够正确表达TPx,其分子量约为28 ku,并被阳性血清所识别.将pVAX1-TPx免疫BALB/c小鼠并采用ELISA检测结果显示,重组质粒免疫组的外周血中抗体、Th2细胞分泌的IL4及IL13细胞因子水平均显著高于空质粒及空白对照组(p＜0.05);但Th1分泌的IFN-γ及IL2水平差异不显著.此外,淋巴细胞增殖试验结果也表明,pVAX1-TPx免疫组显著高于其他两个对照组(p＜0.05).实验数据表明pVAX1-TPx免疫可以有效诱导特异性的体液和细胞免疫.
為評價犬噁絲蟲硫氧還蛋白過氧化物酶(TPx)真覈錶達質粒的免疫原性,本實驗利用RT-PCR方法擴增TPx基因,將其剋隆于真覈錶達載體pVAX1中構建重組質粒pVAX1-TPx,併對其進行體外錶達鑒定及通過特異性抗體水平及相關的免疫因子的檢測,評價其在體內誘導的免疫反應.實驗結果錶明,將pVAX1-TPx轉染于Cos7細胞中能夠正確錶達TPx,其分子量約為28 ku,併被暘性血清所識彆.將pVAX1-TPx免疫BALB/c小鼠併採用ELISA檢測結果顯示,重組質粒免疫組的外週血中抗體、Th2細胞分泌的IL4及IL13細胞因子水平均顯著高于空質粒及空白對照組(p＜0.05);但Th1分泌的IFN-γ及IL2水平差異不顯著.此外,淋巴細胞增殖試驗結果也錶明,pVAX1-TPx免疫組顯著高于其他兩箇對照組(p＜0.05).實驗數據錶明pVAX1-TPx免疫可以有效誘導特異性的體液和細胞免疫.
위평개견악사충류양환단백과양화물매(TPx)진핵표체질립적면역원성,본실험이용RT-PCR방법확증TPx기인,장기극륭우진핵표체재체pVAX1중구건중조질립pVAX1-TPx,병대기진행체외표체감정급통과특이성항체수평급상관적면역인자적검측,평개기재체내유도적면역반응.실험결과표명,장pVAX1-TPx전염우Cos7세포중능구정학표체TPx,기분자량약위28 ku,병피양성혈청소식별.장pVAX1-TPx면역BALB/c소서병채용ELISA검측결과현시,중조질립면역조적외주혈중항체、Th2세포분비적IL4급IL13세포인자수평균현저고우공질립급공백대조조(p＜0.05);단Th1분비적IFN-γ급IL2수평차이불현저.차외,림파세포증식시험결과야표명,pVAX1-TPx면역조현저고우기타량개대조조(p＜0.05).실험수거표명pVAX1-TPx면역가이유효유도특이성적체액화세포면역.
