新疆农业科学
新疆農業科學
신강농업과학
XINJIANG AGRICULTURAL SCIENCES
2014年
4期
741-748
,共8页
王冰洁%郭庆勇%曹雯丽%张杨%李永畅%巴音查汗
王冰潔%郭慶勇%曹雯麗%張楊%李永暢%巴音查汗
왕빙길%곽경용%조문려%장양%리영창%파음사한
牛%环形泰勒虫%PCR%检测%应用
牛%環形泰勒蟲%PCR%檢測%應用
우%배형태륵충%PCR%검측%응용
cattle%Theileria annulata%PCR%detection%application
[目的]建立快速检测牛环形泰勒病的PCR诊断方法.[方法]根据牛环形泰勒虫裂殖子的表面抗原(Tams1)基因,设计一对特异性引物,以地方阳性病例提取的DNA为模板,用PCR扩增出目的条带,经克隆、测序分析后,通过优化反应体系,建立牛环形泰勒虫病的PCR检测方法,并对该方法的特异性、敏感性进行验证试验.[结果]测序结果表明,扩增的目的片段与已知基因序列相似性为99%;该方法检测与牛的其他血液原虫无交叉反应,其最低检出限量为1.6×102 copies/μL.应用所建立的PCR检测方法对新疆吐鲁番市周边疑似地区419份牛全血进行了检测,结果阳性率为52.3% (219/419),而血液涂片检出率为43.7%(183/419).[结论]建立的牛环形泰勒虫PCR快速诊断方法具有有一定的特异性和敏感性,可用于牛环形泰勒虫病的分子诊断和流行病学调查.
[目的]建立快速檢測牛環形泰勒病的PCR診斷方法.[方法]根據牛環形泰勒蟲裂殖子的錶麵抗原(Tams1)基因,設計一對特異性引物,以地方暘性病例提取的DNA為模闆,用PCR擴增齣目的條帶,經剋隆、測序分析後,通過優化反應體繫,建立牛環形泰勒蟲病的PCR檢測方法,併對該方法的特異性、敏感性進行驗證試驗.[結果]測序結果錶明,擴增的目的片段與已知基因序列相似性為99%;該方法檢測與牛的其他血液原蟲無交扠反應,其最低檢齣限量為1.6×102 copies/μL.應用所建立的PCR檢測方法對新疆吐魯番市週邊疑似地區419份牛全血進行瞭檢測,結果暘性率為52.3% (219/419),而血液塗片檢齣率為43.7%(183/419).[結論]建立的牛環形泰勒蟲PCR快速診斷方法具有有一定的特異性和敏感性,可用于牛環形泰勒蟲病的分子診斷和流行病學調查.
[목적]건립쾌속검측우배형태륵병적PCR진단방법.[방법]근거우배형태륵충렬식자적표면항원(Tams1)기인,설계일대특이성인물,이지방양성병례제취적DNA위모판,용PCR확증출목적조대,경극륭、측서분석후,통과우화반응체계,건립우배형태륵충병적PCR검측방법,병대해방법적특이성、민감성진행험증시험.[결과]측서결과표명,확증적목적편단여이지기인서렬상사성위99%;해방법검측여우적기타혈액원충무교차반응,기최저검출한량위1.6×102 copies/μL.응용소건립적PCR검측방법대신강토로번시주변의사지구419빈우전혈진행료검측,결과양성솔위52.3% (219/419),이혈액도편검출솔위43.7%(183/419).[결론]건립적우배형태륵충PCR쾌속진단방법구유유일정적특이성화민감성,가용우우배형태륵충병적분자진단화류행병학조사.