表达西尼罗病毒E蛋白重组腺病毒的构建及鉴定
표체서니라병독E단백중조선병독적구건급감정
Construction of the recombinant adenovirus expressing E protein of West Nile virus
  • 万方数据
    中国预防兽医学报 중국예방수의학보
    CHINESE JOURNAL OF PREVENTIVE VETERINARY MEDICINE
    2013年 4期 267-270 ,共4页

    张翠云%赵晶%陈韬%孙恩成%刘霓红%杨涛%徐青元%王文世%魏鹏

    장취운%조정%진도%손은성%류예홍%양도%서청원%왕문세%위붕

    西尼罗病毒%E蛋白%重组腺病毒 西尼囉病毒%E蛋白%重組腺病毒
    서니라병독%E단백%중조선병독
    为构建表达西尼罗病毒(WNV)E蛋白的重组腺病毒,本实验将WNV的E基因克隆至腺病毒穿梭载体pShuttle-CMV中,经Pme Ⅰ酶切线性化后电转化于含有人5型缺陷腺病毒的骨架的BJ5183感受态大肠杆菌中进行同源重组,构建重组质粒pAd-WNV-E;将其经Pac Ⅰ酶切线性化后通过脂质体介导转染于人胚肾细胞Ad-293细胞,制备重组腺病毒rAd-WNV-E;经western blot以及间接免疫荧光鉴定表明WNVE蛋白在Ad-293细胞中获得有效表达.病毒滴度测定试验结果显示,该重组腺病毒与野毒型腺病毒复制能力相近.该重组腺病毒的构建为进一步研制表达WNVE蛋白的重组腺病毒的疫苗奠定了基础.
    위구건표체서니라병독(WNV)E단백적중조선병독,본실험장WNV적E기인극륭지선병독천사재체pShuttle-CMV중,경Pme Ⅰ매절선성화후전전화우함유인5형결함선병독적골가적BJ5183감수태대장간균중진행동원중조,구건중조질립pAd-WNV-E;장기경Pac Ⅰ매절선성화후통과지질체개도전염우인배신세포Ad-293세포,제비중조선병독rAd-WNV-E;경western blot이급간접면역형광감정표명WNVE단백재Ad-293세포중획득유효표체.병독적도측정시험결과현시,해중조선병독여야독형선병독복제능력상근.해중조선병독적구건위진일보연제표체WNVE단백적중조선병독적역묘전정료기출.
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