医学综述
醫學綜述
의학종술
MEDICAL RECAPITULATE
2014年
6期
1109-1111,1116,封3
,共5页
顾健%王爱玲%郝玉瑜%张梦达%孙继敏
顧健%王愛玲%郝玉瑜%張夢達%孫繼敏
고건%왕애령%학옥유%장몽체%손계민
大鼠骨髓间充质干细胞%乳鼠心肌细胞%5-氮胞苷%共培养%诱导分化
大鼠骨髓間充質榦細胞%乳鼠心肌細胞%5-氮胞苷%共培養%誘導分化
대서골수간충질간세포%유서심기세포%5-담포감%공배양%유도분화
Rat bone marrow mesenchymal stem cells%Neonatal rat cardiomyocytes%5-Azacytidine%Co-culture%Induced differentiations
目的 观察体外不同诱导条件下大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)在不同时间段分化为心肌样细胞的能力及表达心肌细胞特异性标志物的差别.方法 分离培养SD大鼠BMSCs和SD乳鼠心肌细胞并鉴定,取第3代BMSCs分别进行5-氮胞苷(5-Aza)诱导、与心肌细胞共培养及单独培养,分别于第2、4、6、8、10周使用倒置显徼镜观察细胞生长情况和形态变化,反转录-聚合酶链反应检测每组细胞心肌特异性基因肌钙蛋白I(cTnI)、缝隙连接蛋白43(Cx43)和心肌特异性转录因子4(GATA-4)的表达.结果 对照组未见有搏动细胞,cTnI、Cx43和GATA-4基因表达阴性;5-氮胞苷诱导组于第2周时细胞呈梭形且排列方向趋于一致,未见有搏动细胞,cTnI、Cx43基因表达第8周达到高峰,GATA-4基因表达第4周达高峰;共培养组细胞多为梭形,呈肌性排列,可见搏动频率不一致的搏动细胞,cTnI、Cx43基因表达于第2~8周表达逐渐增加,GATA-4基因表达第6周达高峰;相同时段内,共培养组的cTnI、Cx43和GATA-4基因表达高于5-氮胞苷诱导组(P<0.05).结论 BMSCs经5-氮胞苷诱导或与心肌细胞共培养可转化为心肌样细胞并表达基因cTnI、Cx43和GATA-4,且共培养组BMSCs分化为心肌样细胞的能力比5-氮胞苷诱导组强,推测心肌微环境可促进BMSCs定向分化为心肌样细胞.
目的 觀察體外不同誘導條件下大鼠骨髓間充質榦細胞(BMSCs)在不同時間段分化為心肌樣細胞的能力及錶達心肌細胞特異性標誌物的差彆.方法 分離培養SD大鼠BMSCs和SD乳鼠心肌細胞併鑒定,取第3代BMSCs分彆進行5-氮胞苷(5-Aza)誘導、與心肌細胞共培養及單獨培養,分彆于第2、4、6、8、10週使用倒置顯徼鏡觀察細胞生長情況和形態變化,反轉錄-聚閤酶鏈反應檢測每組細胞心肌特異性基因肌鈣蛋白I(cTnI)、縫隙連接蛋白43(Cx43)和心肌特異性轉錄因子4(GATA-4)的錶達.結果 對照組未見有搏動細胞,cTnI、Cx43和GATA-4基因錶達陰性;5-氮胞苷誘導組于第2週時細胞呈梭形且排列方嚮趨于一緻,未見有搏動細胞,cTnI、Cx43基因錶達第8週達到高峰,GATA-4基因錶達第4週達高峰;共培養組細胞多為梭形,呈肌性排列,可見搏動頻率不一緻的搏動細胞,cTnI、Cx43基因錶達于第2~8週錶達逐漸增加,GATA-4基因錶達第6週達高峰;相同時段內,共培養組的cTnI、Cx43和GATA-4基因錶達高于5-氮胞苷誘導組(P<0.05).結論 BMSCs經5-氮胞苷誘導或與心肌細胞共培養可轉化為心肌樣細胞併錶達基因cTnI、Cx43和GATA-4,且共培養組BMSCs分化為心肌樣細胞的能力比5-氮胞苷誘導組彊,推測心肌微環境可促進BMSCs定嚮分化為心肌樣細胞.
목적 관찰체외불동유도조건하대서골수간충질간세포(BMSCs)재불동시간단분화위심기양세포적능력급표체심기세포특이성표지물적차별.방법 분리배양SD대서BMSCs화SD유서심기세포병감정,취제3대BMSCs분별진행5-담포감(5-Aza)유도、여심기세포공배양급단독배양,분별우제2、4、6、8、10주사용도치현요경관찰세포생장정황화형태변화,반전록-취합매련반응검측매조세포심기특이성기인기개단백I(cTnI)、봉극련접단백43(Cx43)화심기특이성전록인자4(GATA-4)적표체.결과 대조조미견유박동세포,cTnI、Cx43화GATA-4기인표체음성;5-담포감유도조우제2주시세포정사형차배렬방향추우일치,미견유박동세포,cTnI、Cx43기인표체제8주체도고봉,GATA-4기인표체제4주체고봉;공배양조세포다위사형,정기성배렬,가견박동빈솔불일치적박동세포,cTnI、Cx43기인표체우제2~8주표체축점증가,GATA-4기인표체제6주체고봉;상동시단내,공배양조적cTnI、Cx43화GATA-4기인표체고우5-담포감유도조(P<0.05).결론 BMSCs경5-담포감유도혹여심기세포공배양가전화위심기양세포병표체기인cTnI、Cx43화GATA-4,차공배양조BMSCs분화위심기양세포적능력비5-담포감유도조강,추측심기미배경가촉진BMSCs정향분화위심기양세포.