中国预防兽医学报
中國預防獸醫學報
중국예방수의학보
CHINESE JOURNAL OF PREVENTIVE VETERINARY MEDICINE
2013年
5期
364-368
,共5页
屈月%葛俊伟%唐丽杰%乔薪瑗%姜艳平%尹光昕%李一经
屈月%葛俊偉%唐麗傑%喬薪瑗%薑豔平%尹光昕%李一經
굴월%갈준위%당려걸%교신원%강염평%윤광흔%리일경
猪传染性胃肠炎病毒%单克隆抗体%高免血清%双抗体夹心ELISA方法
豬傳染性胃腸炎病毒%單剋隆抗體%高免血清%雙抗體夾心ELISA方法
저전염성위장염병독%단극륭항체%고면혈청%쌍항체협심ELISA방법
为建立猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)的快速检测方法,本研究以抗TGEVN蛋白单克隆抗体(MAb)为包被抗体,纯化的抗TGEVN蛋白多克隆抗体(PcAb)为检测抗体建立了TGEV双抗体夹心ELISA方法,优化其反应条件为:抗TGEV N蛋白MAb包被浓度为0.4μg/mL,抗TGEV N蛋白PcAb和酶标二抗的工作浓度分别为3.5 μg/mL和1∶5 000,以P/N＞2,同时OD490nm≥0.316作为阳性判定标准.该ELISA的重复性变异系数小于10％,与猪流行性腹泻病毒、猪细小病毒、猪瘟病毒、猪轮状病毒等无交叉反应.对22份临床猪粪便样品RT-PCR的阳性检出率为31.8％；ELISA的阳性检出率为22.7％,二者符合率达81.8％,结果表明本研究建立的双抗体夹心ELISA方法检测TGEV具有较高的特异性和敏感性,可以用于TGEV的病原学检测.
為建立豬傳染性胃腸炎病毒(TGEV)的快速檢測方法,本研究以抗TGEVN蛋白單剋隆抗體(MAb)為包被抗體,純化的抗TGEVN蛋白多剋隆抗體(PcAb)為檢測抗體建立瞭TGEV雙抗體夾心ELISA方法,優化其反應條件為:抗TGEV N蛋白MAb包被濃度為0.4μg/mL,抗TGEV N蛋白PcAb和酶標二抗的工作濃度分彆為3.5 μg/mL和1∶5 000,以P/N＞2,同時OD490nm≥0.316作為暘性判定標準.該ELISA的重複性變異繫數小于10％,與豬流行性腹瀉病毒、豬細小病毒、豬瘟病毒、豬輪狀病毒等無交扠反應.對22份臨床豬糞便樣品RT-PCR的暘性檢齣率為31.8％；ELISA的暘性檢齣率為22.7％,二者符閤率達81.8％,結果錶明本研究建立的雙抗體夾心ELISA方法檢測TGEV具有較高的特異性和敏感性,可以用于TGEV的病原學檢測.
위건립저전염성위장염병독(TGEV)적쾌속검측방법,본연구이항TGEVN단백단극륭항체(MAb)위포피항체,순화적항TGEVN단백다극륭항체(PcAb)위검측항체건립료TGEV쌍항체협심ELISA방법,우화기반응조건위:항TGEV N단백MAb포피농도위0.4μg/mL,항TGEV N단백PcAb화매표이항적공작농도분별위3.5 μg/mL화1∶5 000,이P/N＞2,동시OD490nm≥0.316작위양성판정표준.해ELISA적중복성변이계수소우10％,여저류행성복사병독、저세소병독、저온병독、저륜상병독등무교차반응.대22빈림상저분편양품RT-PCR적양성검출솔위31.8％；ELISA적양성검출솔위22.7％,이자부합솔체81.8％,결과표명본연구건립적쌍항체협심ELISA방법검측TGEV구유교고적특이성화민감성,가이용우TGEV적병원학검측.
