中国预防兽医学报
中國預防獸醫學報
중국예방수의학보
CHINESE JOURNAL OF PREVENTIVE VETERINARY MEDICINE
2013年
5期
384-387
,共4页
杨磊%王凤龙%丁玉林%丁旭娜%刘德明%赵占宽
楊磊%王鳳龍%丁玉林%丁旭娜%劉德明%趙佔寬
양뢰%왕봉룡%정옥림%정욱나%류덕명%조점관
肿瘤坏死因子-α%奶牛乳腺上皮细胞%α-平滑肌肌动蛋白
腫瘤壞死因子-α%奶牛乳腺上皮細胞%α-平滑肌肌動蛋白
종류배사인자-α%내우유선상피세포%α-평활기기동단백
为研究重组人肿瘤坏死因子-α(TNF-α)对奶牛乳腺上皮细胞(BMEC)中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)mRNA及蛋白表达的影响,本研究采用组织块法体外培养和纯化出BMEC.以不同浓度(0、1 ng/mL、5 ng/mL、10 ng/mL)重组人TNF-α作用BMEC,分别于不同时间(12 h、24 h、48 h、72 h)采用实时荧光定量RT-PCR和western blot方法检测α-SMA mRNA相对表达量及其蛋白表达.结果显示,α-SMA mRNA相对表达量12 h TNF-α处理的各组及24 h,10 ng/mL处理组与对照组相比差异显著(p＜0.05)；随着TNF-α浓度的升高,α-SMA mRNA的相对表达量呈升高趋势；48 h和72 h处理组与对照组相比差异不显著.表明TNF-α对BMEC α-SMA mRNA的表达有一定促进作用.然而,α-SMA的蛋白表达量却很低,只有24 h 10 ng/mL处理组检测到目的蛋白的表达.研究表明,外源性TNF-α能够促进BMEC α-SMA mRNA和蛋白的表达.
為研究重組人腫瘤壞死因子-α(TNF-α)對奶牛乳腺上皮細胞(BMEC)中α-平滑肌肌動蛋白(α-SMA)mRNA及蛋白錶達的影響,本研究採用組織塊法體外培養和純化齣BMEC.以不同濃度(0、1 ng/mL、5 ng/mL、10 ng/mL)重組人TNF-α作用BMEC,分彆于不同時間(12 h、24 h、48 h、72 h)採用實時熒光定量RT-PCR和western blot方法檢測α-SMA mRNA相對錶達量及其蛋白錶達.結果顯示,α-SMA mRNA相對錶達量12 h TNF-α處理的各組及24 h,10 ng/mL處理組與對照組相比差異顯著(p＜0.05)；隨著TNF-α濃度的升高,α-SMA mRNA的相對錶達量呈升高趨勢；48 h和72 h處理組與對照組相比差異不顯著.錶明TNF-α對BMEC α-SMA mRNA的錶達有一定促進作用.然而,α-SMA的蛋白錶達量卻很低,隻有24 h 10 ng/mL處理組檢測到目的蛋白的錶達.研究錶明,外源性TNF-α能夠促進BMEC α-SMA mRNA和蛋白的錶達.
위연구중조인종류배사인자-α(TNF-α)대내우유선상피세포(BMEC)중α-평활기기동단백(α-SMA)mRNA급단백표체적영향,본연구채용조직괴법체외배양화순화출BMEC.이불동농도(0、1 ng/mL、5 ng/mL、10 ng/mL)중조인TNF-α작용BMEC,분별우불동시간(12 h、24 h、48 h、72 h)채용실시형광정량RT-PCR화western blot방법검측α-SMA mRNA상대표체량급기단백표체.결과현시,α-SMA mRNA상대표체량12 h TNF-α처리적각조급24 h,10 ng/mL처리조여대조조상비차이현저(p＜0.05)；수착TNF-α농도적승고,α-SMA mRNA적상대표체량정승고추세；48 h화72 h처리조여대조조상비차이불현저.표명TNF-α대BMEC α-SMA mRNA적표체유일정촉진작용.연이,α-SMA적단백표체량각흔저,지유24 h 10 ng/mL처리조검측도목적단백적표체.연구표명,외원성TNF-α능구촉진BMEC α-SMA mRNA화단백적표체.
