野生动物
野生動物
야생동물
CHINESE WILDLIFE
2012年
2期
91-96
,共6页
彭仕明%李少基%肖建雄%陈武
彭仕明%李少基%肖建雄%陳武
팽사명%리소기%초건웅%진무
小熊猫%蛔虫：内转录间隔区(ITS)%5．8S核糖体DNA%PCR扩增%序列分析
小熊貓%蛔蟲：內轉錄間隔區(ITS)%5．8S覈糖體DNA%PCR擴增%序列分析
소웅묘%회충：내전록간격구(ITS)%5．8S핵당체DNA%PCR확증%서렬분석
Red panda%Ascarids%Internal transcribed spacers (ITS)%5.8S rDNA%PCR amplification%Sequence analysis
以广州动物园小熊猫体内分离出的蛔虫为研究对象，运用PCR方法，以保守引物NC5和NC2扩增其核糖体DNA（rDNA）的内转录间隔区（ITS）和5．8S序列，并对扩增后的片段进行纯化、克隆至pGEM-Teasy载体、转化、测序和序列分析，以鉴定小熊猫蛔虫的种类。结果显示2条蛔虫样品的ITS及5．8SrDNA序列基本一致，总长为913bp，样品间序列相似性为99．7％。将序列与GenBank^TM公布的相关序列进行比较分析，结果显示2条蛔虫的ITS及5．8S序列与黑熊横走贝蛔虫（Baylisascaris transfuga注册号AB571304）相似性分别为98．1％、98．4％，与大熊猫西氏贝蛔虫（Baylisascaris schroederi注册号JN210912）相似性分别为96．9％、97．1％，与猪蛔虫（Ascaris suum注册号AB571302）相似性分别为89．9％、90．1％，与人蛔虫（Ascarislumbricoides注册号AB571296）相似性分别为89．8％、90．1％，ITS-1序列与浣熊贝蛔虫（Baylisascaris procyonis注册号AB053230）相似性分别为92．O％、92．3％。研究结果表明小熊猫体内分离的蛔虫可能为贝蛔属蛔虫，从而为蛔虫的进一步分类、鉴定和遗传变异研究奠定了基础。
以廣州動物園小熊貓體內分離齣的蛔蟲為研究對象，運用PCR方法，以保守引物NC5和NC2擴增其覈糖體DNA（rDNA）的內轉錄間隔區（ITS）和5．8S序列，併對擴增後的片段進行純化、剋隆至pGEM-Teasy載體、轉化、測序和序列分析，以鑒定小熊貓蛔蟲的種類。結果顯示2條蛔蟲樣品的ITS及5．8SrDNA序列基本一緻，總長為913bp，樣品間序列相似性為99．7％。將序列與GenBank^TM公佈的相關序列進行比較分析，結果顯示2條蛔蟲的ITS及5．8S序列與黑熊橫走貝蛔蟲（Baylisascaris transfuga註冊號AB571304）相似性分彆為98．1％、98．4％，與大熊貓西氏貝蛔蟲（Baylisascaris schroederi註冊號JN210912）相似性分彆為96．9％、97．1％，與豬蛔蟲（Ascaris suum註冊號AB571302）相似性分彆為89．9％、90．1％，與人蛔蟲（Ascarislumbricoides註冊號AB571296）相似性分彆為89．8％、90．1％，ITS-1序列與浣熊貝蛔蟲（Baylisascaris procyonis註冊號AB053230）相似性分彆為92．O％、92．3％。研究結果錶明小熊貓體內分離的蛔蟲可能為貝蛔屬蛔蟲，從而為蛔蟲的進一步分類、鑒定和遺傳變異研究奠定瞭基礎。
이엄주동물완소웅묘체내분리출적회충위연구대상，운용PCR방법，이보수인물NC5화NC2확증기핵당체DNA（rDNA）적내전록간격구（ITS）화5．8S서렬，병대확증후적편단진행순화、극륭지pGEM-Teasy재체、전화、측서화서렬분석，이감정소웅묘회충적충류。결과현시2조회충양품적ITS급5．8SrDNA서렬기본일치，총장위913bp，양품간서렬상사성위99．7％。장서렬여GenBank^TM공포적상관서렬진행비교분석，결과현시2조회충적ITS급5．8S서렬여흑웅횡주패회충（Baylisascaris transfuga주책호AB571304）상사성분별위98．1％、98．4％，여대웅묘서씨패회충（Baylisascaris schroederi주책호JN210912）상사성분별위96．9％、97．1％，여저회충（Ascaris suum주책호AB571302）상사성분별위89．9％、90．1％，여인회충（Ascarislumbricoides주책호AB571296）상사성분별위89．8％、90．1％，ITS-1서렬여완웅패회충（Baylisascaris procyonis주책호AB053230）상사성분별위92．O％、92．3％。연구결과표명소웅묘체내분리적회충가능위패회속회충，종이위회충적진일보분류、감정화유전변이연구전정료기출。
Our research objective was to identify ascarid samples isolated from a red panda at the Guangzhou Zoo. The internal transcribed spacer （ITS） and 5.8S of ribosomal DNA （rDNA） of two ascarid samples were amplified by PCR using a pair of conserved primers （ NC5 and NC2 ） , and the amplified products were purified, cloned and sequenced. The lengths of se-quences （ ITS and 5.8S rDNA） from two samples were both 913 bp, and the similarity of sequences was 99. 7% between the two ascarid samples. The similarities of ITS and 5.8S sequences were 98. 1% and 98.4%, respectively , compared with the relevant sequences of Baylisascaris transfuga （ AB571304 ） available from GenBankTM. Similarities were 96. 9% and 97. 1%compared with Baylisascaris schroederi （JN210912） , 89.9% and 90. 1% compared with Ascaris suum （AB571302） , 89.8% and 90. 1% compared with Ascaris lumbricoides （AB571296） , and 92.0% and 92. 3% compared with the ITS - 1 sequence of Baylisascaris procyonis （ AB053230） . We conclude that the asearid nematodes might represent Baylisascaris sp. This research, provided a foundation for further studies of molecular identification and molecular genetics of ascarid.
