中国预防兽医学报
中國預防獸醫學報
중국예방수의학보
CHINESE JOURNAL OF PREVENTIVE VETERINARY MEDICINE
2013年
6期
477-480
,共4页
孟祥莉%母晓宇%刘晓丹%徐凝%王璞%高明春%张文龙%王君伟
孟祥莉%母曉宇%劉曉丹%徐凝%王璞%高明春%張文龍%王君偉
맹상리%모효우%류효단%서응%왕박%고명춘%장문룡%왕군위
溶血素%原核表达%鉴定%多克隆抗体
溶血素%原覈錶達%鑒定%多剋隆抗體
용혈소%원핵표체%감정%다극륭항체
Pyolysin (PLO)%expression%identification%polyclonal-antibody
为研究化脓隐秘杆菌致病机制及其病原学诊断方法,本研究克隆了编码化脓隐秘杆菌溶血素蛋白的plo基因,并构建重组表达质粒pET-plo,转化大肠杆菌Rosetta (DE3)感受态细胞中诱导表达.SDS-PAGE检测结果显示,表达的重组蛋白约为62 ku,western blot分析表明表达的重组蛋白可以与鼠抗化脓隐秘杆菌血清发生反应.采用重组蛋白免疫新西兰白兔制备的多克隆抗体效价达到1∶128 000,western blot和琼脂双扩散试验表明制备的多克隆抗体能够与天然PLO蛋白发生反应.溶血试验表明重组蛋白能够溶解红细胞,制备的多克隆抗体能有效中和重组蛋白的溶血活性.
為研究化膿隱祕桿菌緻病機製及其病原學診斷方法,本研究剋隆瞭編碼化膿隱祕桿菌溶血素蛋白的plo基因,併構建重組錶達質粒pET-plo,轉化大腸桿菌Rosetta (DE3)感受態細胞中誘導錶達.SDS-PAGE檢測結果顯示,錶達的重組蛋白約為62 ku,western blot分析錶明錶達的重組蛋白可以與鼠抗化膿隱祕桿菌血清髮生反應.採用重組蛋白免疫新西蘭白兔製備的多剋隆抗體效價達到1∶128 000,western blot和瓊脂雙擴散試驗錶明製備的多剋隆抗體能夠與天然PLO蛋白髮生反應.溶血試驗錶明重組蛋白能夠溶解紅細胞,製備的多剋隆抗體能有效中和重組蛋白的溶血活性.
위연구화농은비간균치병궤제급기병원학진단방법,본연구극륭료편마화농은비간균용혈소단백적plo기인,병구건중조표체질립pET-plo,전화대장간균Rosetta (DE3)감수태세포중유도표체.SDS-PAGE검측결과현시,표체적중조단백약위62 ku,western blot분석표명표체적중조단백가이여서항화농은비간균혈청발생반응.채용중조단백면역신서란백토제비적다극륭항체효개체도1∶128 000,western blot화경지쌍확산시험표명제비적다극륭항체능구여천연PLO단백발생반응.용혈시험표명중조단백능구용해홍세포,제비적다극륭항체능유효중화중조단백적용혈활성.
