CAJ | 학술논문

目的探讨在大鼠脂肪干细胞(ADSCs)向心肌样细胞分化的一定时期内,通过干预NRG-1/ErbB通路是否可调控其向类窦房结样细胞或工作肌样细胞分化.方法分离培养大鼠ADSCs,免疫荧光测定细胞相关表面抗原鉴定其干细胞特性.取3代ADSCs加入含10 μmol·L-1 5-氮胞苷(5-Aza)和10 μg·L-1 bFGF的培养基处理24 h后分3组向心肌样细胞诱导分化,包括对照组、AG1478组、神经调节蛋白-1(NRG-1)组,取正常培养的为ADSCs组.诱导3周后,通过RT-PCR检测各组NKx2.5、HCN4、TBX3、TBX2基因,Western blot检测TBX3蛋白,膜片钳检测各组动作电位的表达差异.结果 ADSCs加5-Aza 诱导3周后表达心脏早期转录因子Nkx2.5及肌钙蛋白,证明5-Aza可以将ADSCs诱导成心肌样细胞.而AG1478组起搏相关基因(HCN4、TBX3、TBX2)的表达明显强于对照组及NRG-1组(P＜0.05),TBX3蛋白也强于对照组(P＜0.05),并能产生窦房结样动作电位.而NRG-1组Nkx2.5的表达高于对照组及AG1478组(P＜0.05),亦能检测到心室肌样动作电位.结论在大鼠ADSCs向心肌样细胞分化的一定时间内通过干预NRG-1/ErbB通路可使其定向分化为起搏样细胞或工作肌样细胞,这为今后干细胞生物起搏研究做了有益探讨.
목적 탐토재대서지방간세포(ADSCs)향심기양세포분화적일정시기내,통과간예NRG-1/ErbB통로시부가조공기향류두방결양세포혹공작기양세포분화.방법 분리배양대서ADSCs,면역형광측정세포상관표면항원감정기간세포특성.취3대ADSCs가입함10 μmol·L-1 5-담포감(5-Aza)화10 μg·L-1 bFGF적배양기처리24 h후분3조향심기양세포유도분화,포괄대조조、AG1478조、신경조절단백-1(NRG-1)조,취정상배양적위ADSCs조.유도3주후,통과RT-PCR검측각조NKx2.5、HCN4、TBX3、TBX2기인,Western blot검측TBX3단백,막편겸검측각조동작전위적표체차이.결과 ADSCs가5-Aza 유도3주후표체심장조기전록인자Nkx2.5급기개단백,증명5-Aza가이장ADSCs유도성심기양세포.이AG1478조기박상관기인(HCN4、TBX3、TBX2)적표체명현강우대조조급NRG-1조(P＜0.05),TBX3단백야강우대조조(P＜0.05),병능산생두방결양동작전위.이NRG-1조Nkx2.5적표체고우대조조급AG1478조(P＜0.05),역능검측도심실기양동작전위.결론 재대서ADSCs향심기양세포분화적일정시간내통과간예NRG-1/ErbB통로가사기정향분화위기박양세포혹공작기양세포,저위금후간세포생물기박연구주료유익탐토.