福建中医药大学学报
福建中醫藥大學學報
복건중의약대학학보
JOURNAL OF FUJIAN UNIVERSITY OF TRADITIONAL CHINESE MEDICINE
2013年
4期
20-24
,共5页
叶锦霞%王武炼%吴广文%李西海%刘献祥
葉錦霞%王武煉%吳廣文%李西海%劉獻祥
협금하%왕무련%오엄문%리서해%류헌상
透骨消痛胶囊%软骨细胞%肿瘤坏死因子-α%RhoA/Rock信号传导通路
透骨消痛膠囊%軟骨細胞%腫瘤壞死因子-α%RhoA/Rock信號傳導通路
투골소통효낭%연골세포%종류배사인자-α%RhoA/Rock신호전도통로
目的 观察透骨消痛胶囊对TNF-α诱导体外培养大鼠关节软骨细胞Rho/Rock信号通路的影响,探讨其防治骨性关节炎的作用机制. 方法 采用4周龄SD大鼠膝关节软骨建立软骨细胞体外培养体系,选取第3代软骨细胞进行实验,20 ng/mL的TNF-α诱导体外培养软骨细胞的凋亡,诱导成功后,给予透骨消痛胶囊(500、100、20μg/mL)孵育24 h后,用流式细胞仪检测软骨细胞Annexin-Ⅴ观察细胞凋亡情况,采用RT-PCR和Western Blot测定各组软骨细胞RhoA、Rock1和PKN等mRNA和蛋白表达. 结果 TNF-α组细胞凋亡明显增多,透骨消痛胶囊各组能减少软骨细胞的凋亡,TNF-α组的RhoA、Rock1、PKN、MKK3、ERK6、Cbfα1等mRNA和蛋白表达较空白组上升,而透骨消痛胶囊各组对RhoA/Rock信号传导通路关键信号分子RhoA、Rock1、PKN及Cbfα1等的mRNA和蛋白的表达有抑制,差异均具有统计学意义(P＜0.05). 结论 透骨消痛胶囊可减轻TNF-α所致的软骨细胞凋亡,其机制可能与抑制软骨细胞的RhoA/Rock信号通路有关.
目的 觀察透骨消痛膠囊對TNF-α誘導體外培養大鼠關節軟骨細胞Rho/Rock信號通路的影響,探討其防治骨性關節炎的作用機製. 方法 採用4週齡SD大鼠膝關節軟骨建立軟骨細胞體外培養體繫,選取第3代軟骨細胞進行實驗,20 ng/mL的TNF-α誘導體外培養軟骨細胞的凋亡,誘導成功後,給予透骨消痛膠囊(500、100、20μg/mL)孵育24 h後,用流式細胞儀檢測軟骨細胞Annexin-Ⅴ觀察細胞凋亡情況,採用RT-PCR和Western Blot測定各組軟骨細胞RhoA、Rock1和PKN等mRNA和蛋白錶達. 結果 TNF-α組細胞凋亡明顯增多,透骨消痛膠囊各組能減少軟骨細胞的凋亡,TNF-α組的RhoA、Rock1、PKN、MKK3、ERK6、Cbfα1等mRNA和蛋白錶達較空白組上升,而透骨消痛膠囊各組對RhoA/Rock信號傳導通路關鍵信號分子RhoA、Rock1、PKN及Cbfα1等的mRNA和蛋白的錶達有抑製,差異均具有統計學意義(P＜0.05). 結論 透骨消痛膠囊可減輕TNF-α所緻的軟骨細胞凋亡,其機製可能與抑製軟骨細胞的RhoA/Rock信號通路有關.
목적 관찰투골소통효낭대TNF-α유도체외배양대서관절연골세포Rho/Rock신호통로적영향,탐토기방치골성관절염적작용궤제. 방법 채용4주령SD대서슬관절연골건립연골세포체외배양체계,선취제3대연골세포진행실험,20 ng/mL적TNF-α유도체외배양연골세포적조망,유도성공후,급여투골소통효낭(500、100、20μg/mL)부육24 h후,용류식세포의검측연골세포Annexin-Ⅴ관찰세포조망정황,채용RT-PCR화Western Blot측정각조연골세포RhoA、Rock1화PKN등mRNA화단백표체. 결과 TNF-α조세포조망명현증다,투골소통효낭각조능감소연골세포적조망,TNF-α조적RhoA、Rock1、PKN、MKK3、ERK6、Cbfα1등mRNA화단백표체교공백조상승,이투골소통효낭각조대RhoA/Rock신호전도통로관건신호분자RhoA、Rock1、PKN급Cbfα1등적mRNA화단백적표체유억제,차이균구유통계학의의(P＜0.05). 결론 투골소통효낭가감경TNF-α소치적연골세포조망,기궤제가능여억제연골세포적RhoA/Rock신호통로유관.
