CAJ | 학술논문

目的探讨6-羟多巴胺(6-OHDA)及囊泡单胺类转运体(VMAT)功能抑制对大鼠嗜铬细胞瘤PC12细胞凋亡的影响、线粒体膜电位及细胞内Ca2离子的改变.方法阴性对照、6-OHDA(25、50、100、200 μmol/L)、VMAT功能抑制剂利血平(50、100、400、1 600 nmol/L)-6-OHDA(100 μmol/L)作用于PC12细胞,前两大组于小同时間点(0、12、24、36、48 h),后一大组于0、24 h用流式细胞仪检测细胞凋亡率,并用JC-1染色流式细胞仪定量测定线粒体膜电位(△ψm)变化,激光共聚焦显微镜通过荧光探针强度检测PC12细胞内Ca2+离子浓度.结果加入不同浓度的6-OH-DA时PC12细胞凋亡随6-OHDA浓度增加显著上升,具有时間依赖性(P ＜0.001)PC12细胞△ψm降低比例随6-OHDA浓度增加而增加,并随作用时間的延长增加更加明显(P＜0.001);细胞内Ca2+离子浓度随6-OHDA浓度增加而升高,并随作用时间的延长浓度升高更加明显.加入利血平后,相应的细胞凋亡增多,细胞内△Ψm降低比例明显增加,Ca2+离子浓度升高,差异有统计学意义(P＜0.001) 结论 6-OHDA能诱导PC12细胞凋亡,并呈剂量及时间依赖性;其作用机制可能为诱导PC12细胞内△ψm的降低及钙离子超载,并呈剂量及时间依赖性;VMAT功能抑制进一步加重了6-OHDA的内源性毒性,引起△ψm的降低及钙离子超载加重,进一步加再细胞凋亡.
목적 탐토6-간다파알(6-OHDA)급낭포단알류전운체(VMAT)공능억제대대서기락세포류PC12세포조망적영향、선립체막전위급세포내Ca2리자적개변.방법 음성대조、6-OHDA(25、50、100、200 μmol/L)、VMAT공능억제제리혈평(50、100、400、1 600 nmol/L)-6-OHDA(100 μmol/L)작용우PC12세포,전량대조우소동시간점(0、12、24、36、48 h),후일대조우0、24 h용류식세포의검측세포조망솔,병용JC-1염색류식세포의정량측정선립체막전위(△ψm)변화,격광공취초현미경통과형광탐침강도검측PC12세포내Ca2+리자농도.결과 가입불동농도적6-OH-DA시PC12세포조망수6-OHDA농도증가현저상승,구유시간의뢰성(P ＜0.001)PC12세포△ψm강저비례수6-OHDA농도증가이증가,병수작용시간적연장증가경가명현(P＜0.001);세포내Ca2+리자농도수6-OHDA농도증가이승고,병수작용시간적연장농도승고경가명현.가입리혈평후,상응적세포조망증다,세포내△Ψm강저비례명현증가,Ca2+리자농도승고,차이유통계학의의(P＜0.001) 결론 6-OHDA능유도PC12세포조망,병정제량급시간의뢰성;기작용궤제가능위유도PC12세포내△ψm적강저급개리자초재,병정제량급시간의뢰성;VMAT공능억제진일보가중료6-OHDA적내원성독성,인기△ψm적강저급개리자초재가중,진일보가재세포조망.