海洋学研究
海洋學研究
해양학연구
JOURNAL OF MARINE SCIENCES
2012年
4期
78-83
,共6页
童彩环%钱云霞%郑伟贤%韩柳
童綵環%錢雲霞%鄭偉賢%韓柳
동채배%전운하%정위현%한류
果糖-1,6二磷酸酶%鲈鱼%克隆%表达分析
果糖-1,6二燐痠酶%鱸魚%剋隆%錶達分析
과당-1,6이린산매%로어%극륭%표체분석
果糖-1,6-二磷酸酶(fructose 1,6-bisphosphatase,FBP,EC 3.1.3.11)可催化果糖-1,6二磷酸水解成果糖-6-磷酸和无机磷酸盐,是糖异生途径中的关键酶之一.本研究运用SMART RACE技术从鲈鱼Lateolabrax japonicus肝脏中分离克隆了FBP基因的全长cDNA序列,该基因全长1 357bp,其中5'非翻译区和3'非翻译区分别为42 bp和301 bp,开放阅读框为1 014 bp,共编码337个氨基酸.蛋白质分子量约为36.7 kD,理论pI为6.90.氨基酸序列分析表明,鲈鱼FBP与其它动物的肝脏型FBP相似性很高,与裸盖鱼、彩虹胡瓜鱼、斑马鱼、异育银鲫和大西洋鲑的肝脏型FBP的同源性分别为94.3%,90.8%,89.3%,88.1%和84.1%.系统发育分析显示,鲈鱼FBP与其它鱼类的肝脏型FBP成簇后再与哺乳动物的肝脏型FBP聚成一支,然后才与哺乳动物的肌肉型FBP汇成簇.同时用RT-PCR分析了FBP基因在鲈鱼肝脏、肌肉、心脏、眼、肠、肾脏、脂肪、脾脏、鳃和大脑等10个组织的表达,结果表明FBP仅在肝脏、肾脏和肠这3个组织中有较高的表达,与糖异生发生组织基本一致,因此推测该FBP属于肝脏型.
果糖-1,6-二燐痠酶(fructose 1,6-bisphosphatase,FBP,EC 3.1.3.11)可催化果糖-1,6二燐痠水解成果糖-6-燐痠和無機燐痠鹽,是糖異生途徑中的關鍵酶之一.本研究運用SMART RACE技術從鱸魚Lateolabrax japonicus肝髒中分離剋隆瞭FBP基因的全長cDNA序列,該基因全長1 357bp,其中5'非翻譯區和3'非翻譯區分彆為42 bp和301 bp,開放閱讀框為1 014 bp,共編碼337箇氨基痠.蛋白質分子量約為36.7 kD,理論pI為6.90.氨基痠序列分析錶明,鱸魚FBP與其它動物的肝髒型FBP相似性很高,與裸蓋魚、綵虹鬍瓜魚、斑馬魚、異育銀鯽和大西洋鮭的肝髒型FBP的同源性分彆為94.3%,90.8%,89.3%,88.1%和84.1%.繫統髮育分析顯示,鱸魚FBP與其它魚類的肝髒型FBP成簇後再與哺乳動物的肝髒型FBP聚成一支,然後纔與哺乳動物的肌肉型FBP彙成簇.同時用RT-PCR分析瞭FBP基因在鱸魚肝髒、肌肉、心髒、眼、腸、腎髒、脂肪、脾髒、鰓和大腦等10箇組織的錶達,結果錶明FBP僅在肝髒、腎髒和腸這3箇組織中有較高的錶達,與糖異生髮生組織基本一緻,因此推測該FBP屬于肝髒型.
과당-1,6-이린산매(fructose 1,6-bisphosphatase,FBP,EC 3.1.3.11)가최화과당-1,6이린산수해성과당-6-린산화무궤린산염,시당이생도경중적관건매지일.본연구운용SMART RACE기술종로어Lateolabrax japonicus간장중분리극륭료FBP기인적전장cDNA서렬,해기인전장1 357bp,기중5'비번역구화3'비번역구분별위42 bp화301 bp,개방열독광위1 014 bp,공편마337개안기산.단백질분자량약위36.7 kD,이론pI위6.90.안기산서렬분석표명,로어FBP여기타동물적간장형FBP상사성흔고,여라개어、채홍호과어、반마어、이육은즉화대서양해적간장형FBP적동원성분별위94.3%,90.8%,89.3%,88.1%화84.1%.계통발육분석현시,로어FBP여기타어류적간장형FBP성족후재여포유동물적간장형FBP취성일지,연후재여포유동물적기육형FBP회성족.동시용RT-PCR분석료FBP기인재로어간장、기육、심장、안、장、신장、지방、비장、새화대뇌등10개조직적표체,결과표명FBP부재간장、신장화장저3개조직중유교고적표체,여당이생발생조직기본일치,인차추측해FBP속우간장형.