CAJ | 학술논문

本试验旨在探索猪雄性生殖干细胞(mGSCs)体外分离、培养的适宜条件,建立猪雄性生殖干细胞体外培养体系.采用两步酶消化法对新生小猪睾丸生殖干细胞进行了体外分离和初步的培养鉴定,并利用层黏连蛋白和明胶的不同贴壁特性,比较2种差易贴壁分选方法的富集效果,并对传代后的干细胞培养1周后进行碱性磷酸酶染色鉴定,通过免疫荧光技术检测培养细胞是否表达干细胞标志蛋白OCT-4.试验结果表明,层黏连蛋白更适用于猪生殖干细胞的富集、培养,细胞分选效率及增殖生长明显优于采用明胶分选的方法.培养的mGSCs拥有与小鼠mGSCs相同的形态、增殖及表达特征.鉴定结果显示,生长细胞克隆碱性磷酸酶染色呈阳性,支持细胞碱性磷酸酶染色呈阴性；培养的生殖干细胞克隆表达转录蛋白OCT-4,而饲养层支持细胞OCT-4抗体染色则呈阴性.结果表明培养的干细胞克隆仍保持较好的干细胞活性,保持正常的自我复制和分化潜能,初步建立了生殖干细胞培养体系.
본시험지재탐색저웅성생식간세포(mGSCs)체외분리、배양적괄의조건,건립저웅성생식간세포체외배양체계.채용량보매소화법대신생소저고환생식간세포진행료체외분리화초보적배양감정,병이용층점련단백화명효적불동첩벽특성,비교2충차역첩벽분선방법적부집효과,병대전대후적간세포배양1주후진행감성린산매염색감정,통과면역형광기술검측배양세포시부표체간세포표지단백OCT-4.시험결과표명,층점련단백경괄용우저생식간세포적부집、배양,세포분선효솔급증식생장명현우우채용명효분선적방법.배양적mGSCs옹유여소서mGSCs상동적형태、증식급표체특정.감정결과현시,생장세포극륭감성린산매염색정양성,지지세포감성린산매염색정음성；배양적생식간세포극륭표체전록단백OCT-4,이사양층지지세포OCT-4항체염색칙정음성.결과표명배양적간세포극륭잉보지교호적간세포활성,보지정상적자아복제화분화잠능,초보건립료생식간세포배양체계.