中国畜牧兽医
中國畜牧獸醫
중국축목수의
CHINA ANIMAL HUSBANDRY & VETERINARY MEDICINE
2013年
1期
54-56
,共3页
牛病毒性腹泻病毒%E0基因%原核表达%活性检测
牛病毒性腹瀉病毒%E0基因%原覈錶達%活性檢測
우병독성복사병독%E0기인%원핵표체%활성검측
参考牛病毒性腹泻病毒(bovine viral diarrhea virus,BVDV)基因组序列设计1对引物,扩增出650 bp的E0基因片段.将目的片段克隆至pMD18 T载体,经酶切鉴定获得阳性重组质粒并对其进行测序.将E0基因定向亚克隆到pET32a表达载体中,酶切及测序鉴定正确后,转化BL21表达菌,经IPTG诱导得到了以包涵体形式表达的重组蛋白.重组蛋白经亲和层析法纯化后,免疫印迹检测证明纯化的重组蛋白具有良好的活性.
參攷牛病毒性腹瀉病毒(bovine viral diarrhea virus,BVDV)基因組序列設計1對引物,擴增齣650 bp的E0基因片段.將目的片段剋隆至pMD18 T載體,經酶切鑒定穫得暘性重組質粒併對其進行測序.將E0基因定嚮亞剋隆到pET32a錶達載體中,酶切及測序鑒定正確後,轉化BL21錶達菌,經IPTG誘導得到瞭以包涵體形式錶達的重組蛋白.重組蛋白經親和層析法純化後,免疫印跡檢測證明純化的重組蛋白具有良好的活性.
삼고우병독성복사병독(bovine viral diarrhea virus,BVDV)기인조서렬설계1대인물,확증출650 bp적E0기인편단.장목적편단극륭지pMD18 T재체,경매절감정획득양성중조질립병대기진행측서.장E0기인정향아극륭도pET32a표체재체중,매절급측서감정정학후,전화BL21표체균,경IPTG유도득도료이포함체형식표체적중조단백.중조단백경친화층석법순화후,면역인적검측증명순화적중조단백구유량호적활성.
