中国畜牧兽医
中國畜牧獸醫
중국축목수의
CHINA ANIMAL HUSBANDRY & VETERINARY MEDICINE
2013年
1期
28-32
,共5页
斯日古楞%么宏强%马学恩
斯日古楞%麽宏彊%馬學恩
사일고릉%요굉강%마학은
绵羊肺腺瘤病毒%衣壳蛋白%杂交瘤技术%酶联免疫吸附试验%间接免疫荧光方法
綿羊肺腺瘤病毒%衣殼蛋白%雜交瘤技術%酶聯免疫吸附試驗%間接免疫熒光方法
면양폐선류병독%의각단백%잡교류기술%매련면역흡부시험%간접면역형광방법
为了制备特异性的抗绵羊肺腺瘤病毒(jaagsiekte sheep retrovirus,JSRV)内蒙株衣壳蛋白(CA)的单克隆抗体(McAb)杂交瘤细胞系,以原核表达CA蛋白为抗原,免疫BALB/c小鼠,经4次免疫后,取脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞经杂交瘤技术进行融合,同时以表达蛋白作为包被抗原进行特异性ELISA检测,共筛选到6株阳性杂交瘤细胞株.经过3次亚克隆后,最终得到了5株能稳定分泌抗体的单细胞克隆株；再利用CA真核表达蛋白以间接免疫荧光法,对此5株杂交瘤细胞进行进一步的特异性鉴定.结果显示,有3株具有特异性强荧光反应,也能检测到目的基因的表达产物.本试验获得了3株稳定分泌抗JSRV-NM株CA蛋白McAb的杂交瘤细胞系,为建立检测病原的特异性诊断方法、分析JSRV-NM株CA蛋白的功能及鉴定B细胞抗原表位等奠定基础.
為瞭製備特異性的抗綿羊肺腺瘤病毒(jaagsiekte sheep retrovirus,JSRV)內矇株衣殼蛋白(CA)的單剋隆抗體(McAb)雜交瘤細胞繫,以原覈錶達CA蛋白為抗原,免疫BALB/c小鼠,經4次免疫後,取脾細胞與SP2/0骨髓瘤細胞經雜交瘤技術進行融閤,同時以錶達蛋白作為包被抗原進行特異性ELISA檢測,共篩選到6株暘性雜交瘤細胞株.經過3次亞剋隆後,最終得到瞭5株能穩定分泌抗體的單細胞剋隆株；再利用CA真覈錶達蛋白以間接免疫熒光法,對此5株雜交瘤細胞進行進一步的特異性鑒定.結果顯示,有3株具有特異性彊熒光反應,也能檢測到目的基因的錶達產物.本試驗穫得瞭3株穩定分泌抗JSRV-NM株CA蛋白McAb的雜交瘤細胞繫,為建立檢測病原的特異性診斷方法、分析JSRV-NM株CA蛋白的功能及鑒定B細胞抗原錶位等奠定基礎.
위료제비특이성적항면양폐선류병독(jaagsiekte sheep retrovirus,JSRV)내몽주의각단백(CA)적단극륭항체(McAb)잡교류세포계,이원핵표체CA단백위항원,면역BALB/c소서,경4차면역후,취비세포여SP2/0골수류세포경잡교류기술진행융합,동시이표체단백작위포피항원진행특이성ELISA검측,공사선도6주양성잡교류세포주.경과3차아극륭후,최종득도료5주능은정분비항체적단세포극륭주；재이용CA진핵표체단백이간접면역형광법,대차5주잡교류세포진행진일보적특이성감정.결과현시,유3주구유특이성강형광반응,야능검측도목적기인적표체산물.본시험획득료3주은정분비항JSRV-NM주CA단백McAb적잡교류세포계,위건립검측병원적특이성진단방법、분석JSRV-NM주CA단백적공능급감정B세포항원표위등전정기출.
