大豆科学
大豆科學
대두과학
SOYBEAN SCIENCE
2013年
1期
28-32
,共5页
大豆%fad2-1b%fad3c%RNAi%载体构建
大豆%fad2-1b%fad3c%RNAi%載體構建
대두%fad2-1b%fad3c%RNAi%재체구건
构建大豆fad3c基因的沉默载体,旨在为培育生物安全的高油酸低亚麻酸转基因大豆奠定基础.从高蛋白大豆黑农35中克隆大豆种子特异表达启动子GY1;从高油大豆黑农37中克隆fad2-1b基因内含子1;从5个转基因受体大豆中克隆fad3c基因片段,作为正向臂和反向臂.构建筛选标记基因为bar,启动子为GY1,内含子为fad2-1b基因内含子1的双T-DNA载体.将双T-DNA载体转化大肠杆菌DH5a,酶切和序列分析鉴定表明扩增得到的重组质粒正确,命名为pDT-GFAD3I.
構建大豆fad3c基因的沉默載體,旨在為培育生物安全的高油痠低亞痳痠轉基因大豆奠定基礎.從高蛋白大豆黑農35中剋隆大豆種子特異錶達啟動子GY1;從高油大豆黑農37中剋隆fad2-1b基因內含子1;從5箇轉基因受體大豆中剋隆fad3c基因片段,作為正嚮臂和反嚮臂.構建篩選標記基因為bar,啟動子為GY1,內含子為fad2-1b基因內含子1的雙T-DNA載體.將雙T-DNA載體轉化大腸桿菌DH5a,酶切和序列分析鑒定錶明擴增得到的重組質粒正確,命名為pDT-GFAD3I.
구건대두fad3c기인적침묵재체,지재위배육생물안전적고유산저아마산전기인대두전정기출.종고단백대두흑농35중극륭대두충자특이표체계동자GY1;종고유대두흑농37중극륭fad2-1b기인내함자1;종5개전기인수체대두중극륭fad3c기인편단,작위정향비화반향비.구건사선표기기인위bar,계동자위GY1,내함자위fad2-1b기인내함자1적쌍T-DNA재체.장쌍T-DNA재체전화대장간균DH5a,매절화서렬분석감정표명확증득도적중조질립정학,명명위pDT-GFAD3I.
